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文檔簡介
1、研究背景和目的: 病毒性心肌炎(Viralmyocarditis,VM)是兒科常見的后天性心血管疾病之一,可由多種病毒引起,其中柯薩奇病毒B組(CoxsackievirusB,CVB)最常見,約占50%以上。其病理變化主要是心肌廣泛或散在的細胞壞死及周圍間質細胞浸潤。近年來此病發(fā)病率有所增多,大多數(shù)患者可以完全恢復正常心功能,少數(shù)患者臨床癥狀可以改善但會遺留心功能不全,少數(shù)患者進行性心臟擴大,慢性心力衰竭、死亡或需要心臟移植。該
2、病發(fā)病機制至今尚未完全闡明,一般認為病毒的直接損傷作用和免疫異常(包括病毒誘導的免疫和自身免疫反應)參與了病毒性心肌炎的發(fā)病過程。因此,病毒性心肌炎的治療重點一是抗病毒治療,二是阻斷免疫反應對心肌細胞的損害,但對該疾病至今尚無特效療法。本研究以柯薩奇病毒B3腹腔注射純系Balb/c小鼠,制備VM模型,來探討病毒唑對VM小鼠的作用機制和療效。 材料與研究方法: 取120只4周齡Balb/c健康雄性小鼠,體重為15~20克,
3、用隨機數(shù)字法均分為3組,每組40只,包括:空白對照組(A組)、病毒對照組(B組)、病毒唑治療組(C組),B、C組每只小鼠均腹腔接種Nancy株CVB3病毒液0.2ml(10-5TCID50/ml),A組小鼠腹腔接種不含病毒的Eagle's液0.2ml。C組小鼠接種病毒后24小時開始給病毒唑0.3mg/g·d,每日2次灌胃,A、B組給生理鹽水0.15ml,每日2次灌胃。接種病毒后7、14、21天各分別處死10只,摘眼球取血,無菌條件下取心
4、臟,分別觀察以下指標: 1.心臟石蠟包埋后切片,做常規(guī)HE染色,光鏡下觀察組織形態(tài)學改變,計算心肌病理積分,同時透射電鏡觀察心肌超微結構的改變。 2.采用PFU法測定心肌病毒滴度。 3.應用化學發(fā)光法定量檢測血清肌鈣蛋白I(cTnI)的水平。 4.采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法以結合指數(shù)(BI)的方式定量檢測血清抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)水平。 5.流式細胞儀定量檢測外周血T淋巴細胞亞
5、群(CD4、CD8)。 研究結果: 1.心肌病理改變:空白對照組小鼠無死亡,心肌組織形態(tài)無異常,病毒對照組小鼠死亡10只,占25.0%,病毒唑治療組小鼠死亡7只,占17.5%,且兩組小鼠心肌均出現(xiàn)不同程度的病理改變:病毒對照組小鼠7天時心肌已出現(xiàn)病變,14天時達高峰,21天漸恢復。病毒唑治療組小鼠心肌病理損害程度輕于病毒對照組。 2.心肌病毒滴度的變化:空白對照組小鼠心肌病毒滴度為0,病毒對照組和病毒唑治療組在C
6、VB3感染后7天小鼠心肌病毒滴度達高峰,14天后即開始下降,病毒唑治療組小鼠心肌病毒滴度低于病毒對照組。7天時小鼠心肌病毒滴度與心肌病理積分呈顯著正相關(r=0.64P<0.05),而14天時二者無顯著相關性。 3.血清肌鈣蛋白I(cTnI)水平:空白對照組小鼠血清肌鈣蛋白I(cTnI)水平極微量,病毒對照組和病毒唑治療組小鼠在CVB3感染7天后,血清cTnI水平即明顯升高,14天時達高峰,隨后開始降低,漸恢復正常,病毒唑治療組
7、cTnI水平明顯低于病毒對照組。14天時,小鼠血清cTnI與心肌病理積分呈顯著正相關(r=0.70P<0.01)。 4.血清抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)和外周血T細胞亞群CD4、CD8水平:病毒對照組和病毒唑治療組小鼠血清ACA-IgGBI顯著高于空白對照組小鼠,外周血T細胞亞群CD4、CD8顯著低于空白對照組;應用病毒唑治療后可顯著降低ACA-IgGBI水平。 結論: 1.病毒性心肌炎小鼠心肌有明顯病理
8、改變,心肌病毒滴度顯著升高,血清cTnI、抗心磷脂抗體(ACA-IgG)顯著升高,并與心肌病理積分呈正相關。外周血CD4、CD8水平顯著下降。 2.病毒唑能降低病毒性心肌炎小鼠的病死率、心肌病理積分、心肌病毒滴度及血清cTnI的水平,可見病毒唑對小鼠病毒性心肌炎有較好療效,其機制主要是通過降低心肌病毒滴度。 3.病毒唑治療心肌炎小鼠后能降低血清抗心磷脂抗體(ACA-IgG)結合指數(shù),但不能升高外周血CD4、CD8水平,可
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