金省異黃素治療Ⅱ型膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎大鼠的實(shí)驗(yàn)研究及其機(jī)制探討.pdf

1、目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給予RA動(dòng)物模型Ⅱ型膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎(collagen typeⅡ-inducedarthritis，CIA)大鼠金雀異黃素(genistein，Gen)，甲氨蝶呤(methotrexate，MTX)及兩者聯(lián)合的治療，觀察其對(duì)CIA大鼠的治療作用，以探討其作用的可能機(jī)制。
　　 研究對(duì)象：
　　 SD大鼠
　　 方法：
　　 首先，將40只大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組

2、、Gen治療組、MTX治療組和Gen+MTX治療組，每組8只。除空白對(duì)照組外，各組大鼠用Ⅱ型膠原和完全弗氏佐劑注射誘導(dǎo)CIA建立大鼠模型。Gen治療組造模次日開始用藥，每天胃內(nèi)灌注Gen混懸液1ml，劑量為30mg/(kg·d)；MTX治療組造模后開始用藥，每周胃內(nèi)灌注0.2mg/kg；Gen+MTX治療組兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用；空白對(duì)照組和模型對(duì)照組每天灌注等量的生理鹽水。然后，各組大鼠每日進(jìn)行一次關(guān)節(jié)炎指數(shù)(arthritis index

3、，AI)評(píng)分及后肢容積測(cè)定，并于造模后第6周，攝取大鼠關(guān)節(jié)X線片，然后處死大鼠，取膝關(guān)節(jié)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)其滑膜的微血管密度(microvessles density，MVD)，并取血清用Western Blotting法檢測(cè)白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growt

4、h factor，VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetallopeptidase，MMP)-1、2、9的表達(dá)并計(jì)算相對(duì)含量。
　　 結(jié)果：
　　 1、CIA大鼠模型關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分、后肢容積、關(guān)節(jié)X線片及關(guān)節(jié)滑膜組織病理情況與正常大鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示造模成功。
　　 2、各治療組大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分、后肢容積、關(guān)節(jié)X線片及關(guān)節(jié)滑膜組織病理情況較模型對(duì)照組減輕，Gen與MTX治療組無(wú)

5、明顯差異，Gen+MTX治療組的效果更佳。
　　 3、Gen和/或MTX可使CIA大鼠關(guān)節(jié)滑膜新生血管數(shù)目明顯減少，同時(shí)還能降低血清中表達(dá)IL-1β、TNF-α、VEGF和MMP-1、2、9的表達(dá)(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、Gen和/或MTX對(duì)CIA大鼠有治療作用，Gen+MTX治療組的效果更佳。
　　 2、Gen和/或MTX對(duì)CIA大鼠的療效可能是通過(guò)下調(diào)IL-1β、TNF-α的表達(dá)發(fā)揮