景天科三個屬植物組培體系的建立與植株再生研究.pdf

1、本試驗對景天科三個屬植物“初戀”（Echeveria cv.Huthspinke）、“白牡丹”（GraptoveriaTitubans）、“冬美人”（Pachyveria Pachytoides）進行了組織培養(yǎng)體系建立以及植株再生機理的研究。以“初戀”、“白牡丹”、“冬美人”的葉片為試驗材料，通過對葉片進行無菌處理、接種，不定芽誘導，幼芽增殖，試管苗生根和馴化建立一套完整的組織培養(yǎng)體系，同時對體細胞胚胎的發(fā)生過程進行顯微觀察，明確“初戀

2、”、“白牡丹”、“冬美人”體細胞胚胎的發(fā)生機理，為高效的植物組織培養(yǎng)及工廠化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。
　　本試驗的主要結(jié)果如下:
　　1“初戀”、“白牡丹”、“冬美人”組織培養(yǎng)體系的建立
　　不定芽誘導:以植株的葉片為外殖體，滅菌15min，激素采用6-BA、NAA、ZT，進行正交試驗設(shè)計。試驗結(jié)果顯示，MS+6-BA3.0mg/L+NAA1.0mg/L+ZT1.0mg/L為最佳不定芽誘導培養(yǎng)基。
　　幼芽增殖:在培養(yǎng)基中

3、添加6-BA，濃度為1.0mg/L、5.0mg/L，NAA濃度為0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L。經(jīng)增殖培養(yǎng)得到最適宜幼芽增殖培養(yǎng)基:MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.1mg/L。
　　試管苗生根:以1/2MS和MS為基本培養(yǎng)基，添加活性炭及NAA，濃度為0.1mg/L。試驗結(jié)果表明，“初戀”、“白牡丹”最適宜生根培養(yǎng)基為MS+活性炭3.0mg/L+NAA0.1 mg/L，“冬美人”最佳生根培養(yǎng)

4、基為1/2MS+活性炭3.0mg/L+NAA0.1 mg/L。
　　試管苗移栽:移栽基質(zhì)采用純草炭、草炭∶珍珠巖=1∶1、草炭∶沙子=1∶1、草炭∶珍珠巖∶蛭石=1∶1∶1，最適宜“初戀”、“白牡丹”、“冬美人”地上部及地下部生長的煉苗基質(zhì)是純草炭。
　　2“初戀”、“白牡丹”、“冬美人”植株再生機理的研究
　　采用石蠟切片對體細胞胚胎形態(tài)組織學進行觀察，初戀”、“自牡丹”、“冬美人”的葉基部及葉中部在MS+6-BA3

5、.0mg/L+NAA1.0mg/L+ZT1.0mg/L培養(yǎng)基中培養(yǎng)，葉基部成功培養(yǎng)出體細胞胚胎。通過顯微觀察，體胚起源于葉基部具有發(fā)育潛力、細胞質(zhì)稠密、細胞核大等特點的薄壁細胞，發(fā)育過程經(jīng)歷原胚細胞團、球形胚、心形胚、魚雷胚以及子葉胚這五個時期。“初戀”體胚發(fā)育較快，“冬美人”次之，“白牡丹”體胚發(fā)育最慢。
　　葉中部經(jīng)培養(yǎng)發(fā)育出類原球莖，通過組織細胞學觀察，類原球莖起源于葉片近軸面的表皮細胞及亞表皮細胞，發(fā)育形成成熟類原球莖，成