珙桐組織培養(yǎng)與植株再生體系的建立.pdf

1、珙桐(DavidiainvolucrataBaill.)為我國(guó)特有的珙桐科單種屬植物，是第三紀(jì)古熱帶植物區(qū)系的孑遺種，由于其頭狀花序基部有兩枚白色大苞片，如白鴿展翅，故被稱為“中國(guó)鴿子樹”。近年來，由于自然和人為的原因，珙桐的天然分布面積和天然種群數(shù)量急劇下降，現(xiàn)天然分布種群己瀕臨滅絕，被列為國(guó)家一級(jí)保護(hù)植物。 進(jìn)行珙桐組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)研究，為保護(hù)我國(guó)珍貴的珙桐資源和珙桐苗木的產(chǎn)業(yè)化提供思路和技術(shù)，在理論研究和實(shí)際應(yīng)用中都具

2、有十分重要的意義。 本研究以珙桐冬芽、帶芽莖段、葉片及莖段為材料系統(tǒng)地研究了珙桐組織培養(yǎng)直接和間接器官發(fā)生途徑的各個(gè)培養(yǎng)階段中基本培養(yǎng)基、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和活性炭等因素的影響，篩選出了各階段的適宜培養(yǎng)基，成功地獲得了珙桐組織培養(yǎng)再生植株，建立了系統(tǒng)的珙桐組織培養(yǎng)植株再生體系。 初代培養(yǎng)階段，通過正交實(shí)驗(yàn)方案，以珙桐冬芽、葉和莖段等為外植體，誘導(dǎo)冬芽的萌發(fā)和愈傷組織的發(fā)生。結(jié)果表明，WPM+2.0mg/LBA+0.1mg/LNA

3、A為誘導(dǎo)珙桐冬芽萌發(fā)的適宜培養(yǎng)基；以二年生實(shí)生苗的葉和莖段為外植體誘導(dǎo)愈傷組織，由于消毒過程的藥害作用導(dǎo)致沒有愈傷組織的發(fā)生；以珙桐無菌芽葉片和葉柄誘導(dǎo)愈傷組織則獲得成功，適宜的培養(yǎng)基分別為WPM+2.0mg/LBA+0.5mg/L2,4-D和WPM+2.0mg/LBA+2.0mg/LNAA。 繼代增殖培養(yǎng)階段，通過L9(33)正交實(shí)驗(yàn)，得出適于誘導(dǎo)珙桐芽的增殖培養(yǎng)基為WPM+2.0mg/LBA+0.1mg/LZT，BA為主要影

4、響因素；愈傷組織增殖培養(yǎng)則以WPM+1.0mg/LBA+0.5mg/LNAA+2.0mg/LZT為宜，增殖速度快，褐化程度小。 分化培養(yǎng)階段，通過L16(44)正交實(shí)驗(yàn)，得出以無菌苗帶芽莖段誘導(dǎo)腋芽的萌發(fā)以WPM+2.0mg/LBA為最適培養(yǎng)基，將該結(jié)論應(yīng)用于野外采集的珙桐帶芽莖段同樣獲得了成功，誘導(dǎo)率達(dá)91.7％；通過L9(33)正交實(shí)驗(yàn)推出愈傷組織誘導(dǎo)芽的分化以WPM+3.0mg/LBA+0.5mg/LKT+0.1mg/LI