梭果黃芪有效部位及總黃酮提取純化工藝研究.pdf

1、梭果黃芪為《四川省中藥材標準》2010年版收載品種，為豆科植物梭果黃芪AstragalusernestiiComba的干燥根。其藥用歷史悠久，在四川地區(qū)常替代藥典黃芪品種使用。主產(chǎn)于四川的阿壩州、甘孜州、涼山州、雅安地區(qū)和綿陽的部分縣。具有補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌的功效。臨床常用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴；慢性腎炎蛋白尿，糖尿病。
　　首

2、先，分別采用小鼠強迫游泳試驗、碳粒廓清試驗和小鼠溶血素抗體生成試驗對梭果黃芪石油醚提取部位、乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位、水提取部位進行了小鼠抗疲勞活性、免疫活性的篩選，初步確定乙酸乙酯提取部位為有效部位。
　　其次，采用系統(tǒng)預(yù)試法對乙酸乙酯提取部位所含化學成分進行了預(yù)實驗，結(jié)果表明乙酸乙酯部位可能含有黃酮類、皂苷類成分。結(jié)合黃芪現(xiàn)代藥理研究結(jié)果確定了黃酮類成分為抗疲勞作用的有效部位。在此基礎(chǔ)上本文開展了總黃酮紫外分光光度法和

3、毛蕊異黃酮苷HPLC的含量測定方法研究，建立了黃酮的評價方法。
　　第三，開展了有效部位總黃酮提取純化工藝研究，在提取工藝研究中以總黃酮含量、毛蕊異黃酮苷含量、浸膏得率的綜合評分為評價指標，權(quán)重系數(shù)為4：4：2，對不同提取溶劑和提取方法進行了考察，在此基礎(chǔ)上對乙醇濃度、乙醇用量、提取時間這三個因素采用L9(34)正交試驗設(shè)計，并對提取次數(shù)進行考察，通過驗證試驗，確定了最佳提取工藝路線為：提取溶劑為70％乙醇40倍量，提取2次，每次

4、1小時。在純化工藝研究中采用大孔吸附樹脂對梭果黃芪提取液中的總黃酮和毛蕊異黃酮苷進行純化工藝研究，分別對不同樹脂型號、上樣液濃度、上樣量、上樣流速、洗脫溶劑及其用量進行了考察，最終確定以X-5型樹脂純化梭果黃芪提取液中的總黃酮，純化工藝條件：上樣液濃度為總黃酮4.05mg/ml、毛蕊異黃酮苷0.061mg/ml,上樣量為30ml，上樣流速為1.5ml/min,分別以蒸餾水3BV、50%乙醇6BV按1.5ml/min的流速洗脫，棄去蒸餾水

5、洗脫部分，收集50%乙醇洗脫部位，經(jīng)大孔樹脂純化后，總黃酮和毛蕊異黃酮苷的純化倍數(shù)均達到3倍以上，純化效果好。
　　綜上，本文研究確立了梭果黃芪乙酸乙酯提取部位為小鼠抗疲勞活性、免疫活性的有效部位，建立了總黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法，以該方法為評價指標，初步完成了梭果黃芪總黃酮提取純化工藝研究。該研究對梭果黃芪黃酮類化合物制劑、質(zhì)量標準及其藥動學藥效學研究具有一定的參考價值，對梭果黃芪黃酮部位的深入研究和綜合開發(fā)利用打下基礎(chǔ)