甜葉菊中總糖苷和總黃酮的提取、純化工藝及清除自由基研究.pdf

1、甜葉菊富含甜葉菊苷類化合物和黃酮類化合物。甜葉菊糖苷作為甜味劑，在體內(nèi)不蓄積、不參加代謝、無毒性，被廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥及食品行業(yè)中，被稱為繼蔗糖、甜菜糖之后的第三種天然糖源，其有著廣泛的應(yīng)用范圍和市場前景。黃酮類化合物具有抗腫瘤活性、抗炎、抗氧化自由基活性，還具有降壓、降血脂及提高機(jī)體免疫力等藥理活性。
　　 本論文以酒泉產(chǎn)甜葉菊葉為原料，研究了甜葉菊總糖苷和總黃酮的提取、純化的方法，并與Vc作對照，研究了甜葉菊糖苷及總黃酮的清除自

2、由基的能力。
　　 1.通過單因素和正交試驗(yàn)確定甜葉菊總糖苷的最優(yōu)提取工藝條件:提取溫度90℃、固液比1∶20（g/mL）、提取時(shí)間2.5 h。在此條件下，總糖苷得率為11.39％。最佳工藝采用水作溶劑提取甜葉菊總糖苷，成本低廉，糖苷得率高，有利于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。
　　 2.通過對甜葉菊總糖苷的初步除雜方法的考察，確定了乙醇沉淀法除雜:95％的乙醇，滴加速度為10 mL/min，體系濃度達(dá)到70％。此法除雜效果最好，總糖苷損

3、失率僅為6.8％。
　　 3.通過單因素試驗(yàn)確定了LS-809大孔吸附樹脂純化甜葉菊總糖苷的最佳工藝條件:上樣液質(zhì)量濃度為12mg/mL，吸附流速為3mL/min，上樣量為5BV，解吸液為70％的乙醇，解吸液流速為2mL/min。然后再經(jīng)LS-850樹脂脫色，純度達(dá)到78.42％。
　　 4.研究溶劑重結(jié)晶法分離甜葉菊糖苷(St)和萊鮑迪苷A（RA）:無水甲醇作為重結(jié)晶溶劑，St結(jié)晶率達(dá)到53％，純度達(dá)到95.2％。結(jié)晶

4、后的母液濃縮至三分之一體積，加入等量的異丙醇，RA的結(jié)晶率達(dá)到15％，純度達(dá)到87.5％。
　　 5.通過單因素和正交試驗(yàn)確定甜葉菊總黃酮的最優(yōu)提取工藝條件:固液比1∶20(g/mL)，提取時(shí)間2.5 h，乙醇體積濃度80％，提取溫度80℃，此條件下，總黃酮得率為4.21％。本工藝提取甜葉菊渣中總黃酮，簡單易行，安全可靠，有利于甜葉菊資源的合理利用。
　　 6.通過單因素試驗(yàn)確定了AB-8大孔樹脂純化甜葉菊總黃酮的最佳工

5、藝條件:吸附流速2mL/min、上樣液質(zhì)量濃度1.5mg/mL、上樣液pH3.5、上樣量4BV、解吸液為體積分?jǐn)?shù)50％乙醇溶液，解吸流速1.5mL/min、解吸量5BV。經(jīng)處理后總黃酮純度為50.11％。然后用乙酸乙酯在常溫條件下萃取5次，得到甜葉菊渣中總黃酮純度為91.8％。結(jié)果表明:通過AB-8大孔樹脂吸附和乙酸乙酯萃取相結(jié)合的方法，能很好的純化甜葉菊渣中總黃酮。
　　 7.研究甜葉菊糖苷和總黃酮的抗自由基活性，并和Vc對照

6、，了解其清除自由基能力:甜葉菊總黃酮對DPPH·、·OH、O2-·都有不同程度的清除作用，其對·OH的清除能力很強(qiáng)，高于Vc，其對DPPH·的清除能力也比較明顯，但稍低于Vc。其對O2-·的清除能力一般，低于Vc。說明甜葉菊總黃酮是一種很好的天然自由基清除劑。甜葉菊糖苷對·OH有一定的清除作用，IC50值為5.35ug/mL，可以作自由基清除劑，而對DPPH·、O2-·的清除作用都不明顯，說明甜葉菊糖苷不適合作DPPH·和O2-·的清除