P120ctn及相關(guān)蛋白在宮頸癌組織和細胞系中的表達及生物學意義.pdf

1、目的：檢測P120ctn及相關(guān)的E-cad、β-cat和Ki67蛋白在宮頸癌組織中的表達與分布，分析P120ctn及相關(guān)蛋白的表達與宮頸癌分化程度、增殖程度、FIGO臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。在此基礎上，檢測宮頸癌細胞系中P120ctn及相關(guān)蛋白的表達，分析細胞系與組織的表達是否一致，探討P120ctn異常表達是否涉及到P120ctn的磷酸化修飾，并進一步檢測宮頸癌細胞系中P120ctn及E-cad mRNA的表達，證實P120ctn

2、及相關(guān)蛋白異常表達在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為宮頸癌的診斷及治療提供新的靶點，為進一步研究腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機制奠定理論基礎。 方法: 1)免疫組織化學SP法檢測宮頸鱗癌組織中P120ctn、β-cat、E-cad及Ki67蛋白的表達、分布。2)免疫細胞化學檢測宮頸腺癌(Hela)、鱗癌(Caski)細胞系中P120ctn、β-cat、E-cad及Ki67蛋白的表達、分布。3)蛋白質(zhì)印跡實驗(western-blot)檢測Hel

3、a、Caski細胞系中P120ctn與磷酸化P120ctn的表達。4)RT-PCR及實時熒光定量PCR檢測Hela、Caski細胞系中P120ctn、E-cad mRNA的表達。 結(jié)果: 1)正常宮頸組織中P120ctn、β-cat、E-cad表達在胞膜，胞漿少見。宮頸鱗癌組織中P120ctn及E-cad胞膜表達降低，出現(xiàn)胞漿表達，異常表達率分別為 78.8％(41/52)，73.1％(38/52)；β-cat除了胞漿表達以外，

4、還伴隨胞核表達，異常表達率為75.0％(39/52)；與正常宮頸組織相比差異都有顯著性。 2)P120ctn、β-cat、E-cad的異常表達與癌細胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，與年齡、臨床分期無關(guān)(P>0.05)。3)正常宮頸組織中Ki67蛋白不表達或表達較少，陽性表達率為15.4％ (4/26)，宮頸鱗癌組織中Ki67蛋白出現(xiàn)陽性表達，陽性表達率為 76.9％(40/52)，差異有顯著性；Ki67蛋白陽性表達與臨床分期

5、有關(guān)(P<0.05)，與年齡、癌細胞分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)；P120ctn異常表達與Ki67蛋白陽性表達呈正相關(guān)(P<0.05)。 4)正常臍靜脈內(nèi)皮細胞系(HECV)中，P120ctn及β-cat大部分表達在胞膜，E-cad胞膜和胞漿表達量都少，Ki67陰性表達；Hela、Caski細胞系中，P120ctn及β-cat胞膜表達減少，胞漿表達增加，E-cad胞膜表達丟失，有少量胞漿表達，Ki67蛋白陽性表達。5)HEC

6、V、Hela與Caski細胞系中都有P120ctn與磷酸化P120ctn的表達； P120ctn在HECV細胞中的表達量高于Hela及Caski細胞(P<0.05)，Hela與Caski細胞之間沒有表達量差異(P>0.05)；磷酸化P120ctn在HECV細胞中表達量低于Hela及Caski細胞(P<0.05)，Hela細胞低于Caski細胞(P<0.05)。6)HECV、Hela與Caski細胞系中都有P120ctn與E-cad mR

7、NA的表達，P120ctn在Hela、Caski中的表達量分別為HECV的74.32％、78.34％，E-cad在Hela、Caski中的表達量分別為HECV的25.85％、29.84％。 結(jié)論： 1) P120ctn及相關(guān)蛋白E-cad、β-cat的異常表達參與了宮頸癌的惡性轉(zhuǎn)化過程，與腫瘤的分化、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)，三者異常變化可作為宮頸癌變的參考依據(jù)。 2)P120ctn的異常表達與Ki67蛋白陽性表達呈正相關(guān)，提示P120c

8、tn的異常表達不僅與癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，還可能啟動了與細胞增殖有關(guān)的異常信號轉(zhuǎn)導通路，細胞增殖程度越快，癌細胞浸潤深度越深，播散范圍越廣。3)宮頸癌細胞系中P120ctn的異常表達涉及到P120ctn的磷酸化修飾，磷酸化促使P120ctn與鈣粘蛋白-連環(huán)蛋白復合體(cadherin catenin complex， CCC)分離，發(fā)生異常表達。4)轉(zhuǎn)錄水平上，宮頸癌細胞中P120ctn及E-cad的轉(zhuǎn)錄水平低于正常內(nèi)皮細胞，提示P12