轉(zhuǎn)基因抗蟲早粳稻HD1和HD3品系性狀鑒定及土壤環(huán)境安全性評(píng)估.pdf

1、水稻（Oryza sativaL.）原產(chǎn)于亞洲熱帶，是一年生禾本科植物，具有24條染色體。黑龍江省作為我國水稻生產(chǎn)的主產(chǎn)區(qū)，同時(shí)也是受蟲害較為嚴(yán)重的地區(qū)，每年因蟲害損失上百萬元。傳統(tǒng)蟲害的防治方法主要依賴于化學(xué)農(nóng)藥，但由于其長(zhǎng)期大面積的施用，不僅會(huì)使生態(tài)環(huán)境遭到破壞、害蟲產(chǎn)生抗藥性，食用后還會(huì)威脅人畜的身體健康。傳統(tǒng)的常規(guī)育種不僅周期長(zhǎng)，時(shí)間久，而且很難培育出優(yōu)良的抗蟲品種。隨著分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，科技手段逐漸成熟，轉(zhuǎn)Bt基因水稻的出

2、現(xiàn)成為了解決此問題的有效途徑。
　　目前水稻空育131在黑龍江省的種植面積最大，同時(shí)也是中國累積種植面積最大的粳稻品種;松粳9號(hào)以其高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)等特性也被廣泛種植，本實(shí)驗(yàn)以轉(zhuǎn)Bt基因空育131和松粳9號(hào)為供試材料，對(duì)其進(jìn)行深入、全面的分子性狀檢測(cè)、農(nóng)藝性狀鑒定以及土壤安全性評(píng)估，主要檢測(cè)結(jié)果如下:
　　1、通過Basta抗感性篩選、試紙條檢測(cè)及常規(guī)PCR檢測(cè)等手段，經(jīng)過T8～T10代3個(gè)世代的篩選，成功鑒定出轉(zhuǎn)Bt基因空育13

3、1和松粳9號(hào)，HD1（空育131（cry1C*/bar））和HD3(松粳9號(hào)(cry1 C*/bar)）品系。
　　2、對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻HD1和HD3抽穗期、苗期各組織和糙米中目的基因mRNA的表達(dá)量、Bt基因轉(zhuǎn)錄水平的檢測(cè)表明:不同品系相同組織同一生長(zhǎng)期mRNA的表達(dá)量存在差異HD1-1＞HD1-2，HD3-1＞HD3-2;相同品系不同組織同一生長(zhǎng)期存在明顯差異;相同品系同一生長(zhǎng)期不同組織cry1C蛋白的表達(dá)量存在明顯差異;相同品系

4、不同生長(zhǎng)期相同組織cry1C蛋白的表達(dá)量存在顯著性差異;不同品系同一生長(zhǎng)時(shí)期相同組織cry1C蛋白的表達(dá)量存在差異，HD1-1＞HD1-2，HD3-1＞HD3-2;完熟期糙米各個(gè)組織中cry1C蛋白的表達(dá)量相對(duì)于水稻植株整個(gè)生長(zhǎng)期來說都是最低的。
　　3、轉(zhuǎn)基因水稻HD1和HD3目的基因在各世代植株中穩(wěn)定遺傳，均以單拷貝插入到水稻基因組中，且外源基因的插入位點(diǎn)為基因間區(qū);其中HD1-1品系外源基因插入到水稻第3號(hào)染色體上，HD3-