慢性非細(xì)菌性前列腺炎動物模型的建立及脊髓氧化應(yīng)激參與CP-CPPS疼痛的神經(jīng)機(jī)制研究.pdf

1、目的:1.探討3％λ-角叉菜膠前列腺內(nèi)注射建立大鼠非細(xì)菌性前列腺炎模型的有效性和持續(xù)時間;2.探討脊髓氧化應(yīng)激與前列腺炎的關(guān)系及其可能作用機(jī)制;3.探討N-乙酰半胱氨酸(NAC)治療模型大鼠前列腺炎的效果及其機(jī)制。
　　方法:選用SD大鼠為實驗動物，麻醉無菌條件下向其前列腺左右腹側(cè)葉各注入3％λ-角叉菜膠各50ul建立大鼠非細(xì)菌性前列腺炎模型，對照組注入等量生理鹽水。分別在24小時、7天、14天、30天時間點測機(jī)械痛和熱痛閾值，處

2、死后取其前列腺行組織學(xué)檢查，并以Western-blot法檢測前列腺COX-2表達(dá);以Evens blue滲漏測定評估血漿滲漏情況評估前列腺局部炎癥。
　　同法建模，分別在相應(yīng)時間點處死大鼠取L6-S1段脊髓，以酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定脊髓8-異前列腺素(8-epi PGF2a)含量;以黃嘌呤氧化酶法測定脊髓組織總超氧化物歧化酶(T-SOD)的活力;以caspase-3免疫熒光法檢測脊髓神經(jīng)元凋亡水平。
　　10％N

3、-乙酰半胱氨酸于建模前半小時及術(shù)后一周每日腹腔注射(300mg/kg)，角叉菜膠前列腺內(nèi)注射后24h、7天測機(jī)械痛和熱痛閾值，處死大鼠取前列腺及L6-S1段脊髓，分別檢測前列腺COX2蛋白、脊髓8-異前列腺素、SOD活力、細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:3％λ-角叉菜膠SD大鼠前列腺內(nèi)注射后24小時，前列腺間質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)明顯炎細(xì)胞聚集，機(jī)械痛和熱痛閾值均較對照組顯著下降(p=0.022，p=0.014)，COX2蛋白表達(dá)明顯增多(p=0.0

4、25)，Evens blue滲出量顯著增加(p＜0.001);隨時間推移，疼痛閾值持續(xù)下降，機(jī)械痛閾值下降持續(xù)約1-2周，2周時恢復(fù)正常;熱痛閾值下降持續(xù)約2-4周，30天時恢復(fù)正常;COX2表達(dá)量升高持續(xù)約2-4周，30天時恢復(fù)正常;Evens blue滲出增加持續(xù)約2-4周，30天時恢復(fù)正常。
　　隨著痛閾下降，脊髓氧化應(yīng)激程度加劇。與對照組相比，7天時脊髓8-epi PGF2a含量顯著上升(p=0.008)，SOD活力顯著下

5、降(p=0.001)，14天時仍有顯著差異(p=0.001，p=0.012)，30天時均恢復(fù)正常。7天、14天時實驗組脊髓caspase-3熒光染色強(qiáng)度明顯強(qiáng)于對照組，24小時、30天時與對照組無顯著差異。
　　與單純模型組相比，NAC干預(yù)組大鼠熱痛和機(jī)械痛閾值在角叉菜膠前列腺內(nèi)注射后24小時、7天顯著提升;COX2蛋白表達(dá)量下降(P=0.046，P=0.027);脊髓8-epi PGF2a含量降低，24小時時無統(tǒng)計學(xué)意義，7天具

6、有顯著差異(P=0.035);SOD活力升高，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義;7天時干預(yù)組caspase-3熒光染色強(qiáng)度弱于模型組，與對照組相當(dāng)。
　　結(jié)論:1.3％λ-角叉菜膠前列腺內(nèi)注射建立大鼠非細(xì)菌性前列腺炎模型安全有效，誘導(dǎo)炎癥至少持續(xù)2周;2.角叉菜膠所誘導(dǎo)大鼠非細(xì)菌性前列腺炎模型L6-S1段脊髓中樞存在明顯氧化應(yīng)激。提示脊髓初級中樞病變與非細(xì)菌性前列腺炎關(guān)系密切;3.脊髓中樞氧化應(yīng)激可能通過誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡導(dǎo)致非細(xì)菌性前列腺炎疼