白花丹參對(duì)缺血再灌注致腦損傷保護(hù)作用的研究.pdf_第1頁
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1、泰山醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文白花丹參對(duì)缺血再灌注致腦損傷保護(hù)作用的研究姓名:王曉哲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師:白波張秋玲20090501公式計(jì)算ATPase活力。8內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)蛋白的表達(dá):石蠟切片,免疫組織化學(xué)染色,顯微鏡下觀察eNOS的表達(dá)。9基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrixmetalloproteinase9,MMP9)蛋白的表達(dá):石蠟切片,免疫

2、組織化學(xué)染色,顯微鏡下觀察MMP9的表達(dá)。10內(nèi)皮抑素(endostatin,ES)蛋白的表達(dá):石蠟切片,熒光免疫組織化學(xué)染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察ES的表達(dá)。11腦血流量(cerebralbloodflowCBF)的檢測(cè):激光多普勒血流儀(1aserflowmetryLDF)檢測(cè)各組術(shù)后3d大鼠海馬CAI區(qū)CBF占術(shù)前基礎(chǔ)CBF的百分比。12腦缺血再灌注后腦細(xì)胞線粒體跨膜電位(mitochondrialtransmembranepo

3、tential,一般用△’王,m表示)的測(cè)定:制備腦組織單細(xì)胞懸液,羅丹明123(rhodanminel23,Rhl23)染色,流式細(xì)胞儀(flowcytometryFCM)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度,分析△甲m的變化。13半胱氨酸天冬酶3(cysteine—aspirateprotease3,Caspase3)蛋白的表達(dá):石蠟切片,熒光免疫組織化學(xué)染色,激光共聚焦顯微鏡下觀察Caspase3的表達(dá)。14腦缺血再灌注后腦細(xì)胞凋亡發(fā)生率(thei

4、ncidenceofapoptosis)的測(cè)定:制備單細(xì)胞懸液,進(jìn)行AnnexinVFITCPI雙染,通過FCM檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度,分析腦組織凋亡發(fā)生率的變化。結(jié)果1I/R組與sham組比較:腦缺血再灌注后腦組織SOD活力明顯降低(尸001);MDA含量明顯升高(P001);腦組織微量NaKATP酶的活性明顯降低(P001):eNOS表達(dá)明顯升高(P001);MMP9表達(dá)明顯上調(diào)(尸O01);ES表達(dá)明顯增加(尸O01);手術(shù)后海馬CA

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