人工誘導野生桑種質(zhì)資源染色體的加倍.pdf

1、桑樹是多年生落葉木本植物，是我國重要的生態(tài)經(jīng)濟型樹種。桑樹多倍體具有高產(chǎn)，優(yōu)質(zhì)，抗逆性強等特點。目前人工誘導桑樹染色體加倍的研究大多以雜交桑種子萌發(fā)的實生幼苗或栽培桑樹的器官部位為材料。例如：對四倍體桑樹誘導獲得的八倍體材料，進而雜交選育桑葉優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的六倍體桑樹品種，以提高桑葉的產(chǎn)量。以野生桑資源作為材料進行桑樹多倍體誘導還未見報道。而不同倍數(shù)性材料的形態(tài)學和生化成分上的差異對多倍體育種具有指導意義，同時為闡明植物多倍體進化機制提供有價

2、值的信息。本研究以野生長穗桑種質(zhì)資源云7(2n=7x=49）和川桑（2n=2x=14）為材料，建立不定芽誘導和生根體系，以二甲基亞砜為滲透劑，研究秋水仙素的處理濃度和處理時間對誘導多倍體植株的影響，并用組培苗的腋芽多代持續(xù)分離對得到的混倍體進行分離篩選，得到倍性穩(wěn)定的14倍體（2n=14x=98)和4倍體（2n=4x=28）。并對移栽后的云7和14倍體誘變植株的生長狀況進行相關指標測定。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴以冬芽為實驗材料

3、，對野生長穗桑種質(zhì)資源云7進行不定芽誘導，不定芽誘導培養(yǎng)基：MS+30g/L蔗糖+1.5 mg/L6-芐基氨基嘌呤+100 mg/L肌醇+8 g/L瓊脂，誘導獲得不定芽。將由不定芽獲得的株系接種于生根培養(yǎng)基：MS+30g/L蔗糖+0.5 mg/L萘乙酸+0.4 g/L活性炭+8 g/L瓊脂，誘導根系發(fā)生。獲得的云7組培苗不定芽為染色體加倍誘導材料，以濃度為2g/L的二甲基亞砜(DMSO)為滲透劑，使用濃度為1 g/L、2 g/L、3g/

4、L的秋水仙素浸泡云7的不定芽，浸泡時間分別為2 d、2.5 d、3 d，結果發(fā)現(xiàn)2 g/L的秋水仙素處理2.5 d后，被誘變不定芽的死亡率為53.76％，在這種接近半致死率的條件下誘導桑樹不定芽的染色體加倍的效果最佳。采用組培苗的腋芽多代持續(xù)分離，最終得到2株穩(wěn)定的14倍體長穂桑材料。⑵云7及倍性穩(wěn)定的誘變植株（14倍體）性狀測定。云7和誘變植株組培苗生根移栽入大田3個月后，測定其形態(tài)、光合特性等指標，實驗結果表明植株加倍之后，葉片差異

5、較大：葉片變大、變寬、厚，葉緣鋸齒加重，葉片顏色變深；莖粗較粗，株高變高，植株生長變快；葉片氣孔細胞變大，密度變小，光合速率增加，整體長勢較好。⑶以采集的川桑的種子為實驗材料，通過胚挽救技術，使其萌發(fā)，取其下胚軸進行不定芽誘導，不定芽培養(yǎng)基為：MS+30g/L蔗糖+1.0 mg/L6-芐基氨基嘌呤+8g/L瓊脂。以獲得的川桑組培苗不定芽為材料，進行染色體加倍誘導，以1g/L二甲基亞砜(DMSO)為滲透劑，使用濃度為0.1 g/L、0.5