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文檔簡介
1、目的:探討穿心蓮對人臍靜脈內(nèi)皮細胞粘附分子表達的影響及機制研究。
方法:產(chǎn)科手術室取健康新生兒臍帶(無菌條件下),用胰酶消化人臍靜脈內(nèi)皮細胞,并進行原代培養(yǎng)及細胞傳代。選擇第三代細胞進行形態(tài)學觀察,使用免疫熒光鑒定內(nèi)皮細胞。實驗一共分成5組,每個組設6個復孔:
(1)、空白對照組,僅給予M199基礎培養(yǎng)基培養(yǎng)內(nèi)皮細胞24小時。
(2)、氧化修飾的脂蛋白(ox-LDL)組。
(3)、ox-LDL+A
2、P50mg/L組。
(4)、ox-LDL+AP100mg/L組。
(5)、ox-LDL+AP200mg/L組。
37攝氏度溫箱培養(yǎng)48小時后取上清、離心;用ELISA試劑盒檢測ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素蛋白濃度;用胰酶進行消化并收集各組的細胞,采用流式細胞術測定內(nèi)皮細胞表面抗原CD40/CD40L表達的平均免疫熒光強度。
結(jié)果:與對照組相比,ox-LDL組可促進粘附分子VCAM-1、I
3、CAM-1、E-選擇素蛋白及CD40、CD40L的表達,P<0.01;與ox-LDL組相比,低濃度的穿心蓮內(nèi)酯(50mg/L)對粘附分子VCAM-1、ICAM-1、E-選擇素蛋白及CD40、CD40L的表達無明顯影響,P>0.05;而中、高濃度的穿心蓮內(nèi)酯(100mg/L、200mg/L)對粘附分子VCAM-1、ICAM-1、E-選擇素蛋白及CD40、CD40L的表達有抑制作用,P<0.01,其中高濃度的穿心蓮內(nèi)酯抑制作用更明顯,P<0
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