天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)小鼠小腸黏膜免疫的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的：研究天蠶素 A-馬蓋寧雜合肽對(duì)小鼠小腸黏膜免疫功能的影響并探討其作用機(jī)制。
　　方法：表達(dá)天蠶素A-馬蓋寧雜合肽混合檢測(cè)蛋白質(zhì)濃度；取18只SPF級(jí)雌性、6周齡、體重相近的BALB/c小鼠隨機(jī)分組：空白組（0.9％生理鹽水0.75mL）、低劑量雜合肽組（1/2原液蛋白質(zhì)濃度雜合肽0.75mL）、高劑量雜合肽組（原液蛋白質(zhì)濃度雜合肽0.75mL）灌胃六周。于灌胃開始前后記錄空腹體重并計(jì)算平均日增重； HE染色觀察小腸黏膜形態(tài)；

2、平板計(jì)數(shù)測(cè)定盲腸內(nèi)容物腸道菌群；BrdU摻入法檢測(cè)Peyer’s patches處 T、B淋巴細(xì)胞的增殖能力；免疫組化測(cè)定小腸黏膜內(nèi) IgA的陽性表達(dá)量； ELISA測(cè)定小腸組織勻漿液中IL-2、IFN-γ和IL-4的含量以及IFN–γ/IL-4；Real-time PCR檢測(cè)小腸組織NF-КB mRNA水平及ELISA測(cè)定小腸組織勻漿液內(nèi)NF-КB蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果：天蠶素A-馬蓋寧雜合肽有明顯抑菌活性，混合后蛋白質(zhì)濃度為

3、0.52 mg/mL；灌胃6周后，雜合肽組小鼠體重顯著大于空白組（P<0.05）；十二指腸絨毛長度顯著大于空白組（P<0.05）；各段小腸隱窩深度均明顯低于空白組（P<0.05）且V/C均明顯高于空白組（P<0.05）；雜合肽組盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌數(shù)量顯著低于空白組（P<0.05），雙歧桿菌與乳酸桿菌數(shù)量顯著高于空白組（P<0.05）且有劑量依賴性；雜合肽組小腸集合淋巴結(jié)內(nèi)CD3+T細(xì)胞中CD3+BrdU+細(xì)胞百分率及B220+B細(xì)胞中

4、B220+BrdU+細(xì)胞百分率均顯著高于空白組（P<0.05）；雜合肽組小腸黏膜內(nèi)IgA及IL-2、IFN-γ和IL-4的陽性表達(dá)水平均顯著升高（P<0.05），IFN-γ/IL-4差異不顯著（P<0.05）；小腸組織中NF-КB mRNA水平及蛋白表達(dá)量均顯著高于空白組（P<0.05）。
　　結(jié)論：天蠶素 A-馬蓋寧雜合肽雜合肽灌胃6周后可提高小鼠的體重及小腸黏膜免疫水平。機(jī)制是有效改善小腸黏膜結(jié)構(gòu)促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收；顯著降