白鮮皮化學成分及藥理活性研究.pdf

1、目的:對蕓香科白鮮屬植物白鮮（Dictamnus dasycarpus Turcz.）干燥根皮的化學成分進行分離鑒定，對其中8種化學成分進行細胞毒試驗，通過建立高效液相色譜方法對白鮮皮中檸檬苦素、黃柏酮、梣酮三種活性成分進行含量測定，探討不同提取溶劑對三種成分提取得率的影響，優(yōu)化白鮮皮中三種成分的提取工藝，為確定最優(yōu)提取工藝奠定基礎。
　　方法:采用硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、C18反相色譜柱層析、半制備液

2、相等技術(shù)手段，并結(jié)合化合物的理化性質(zhì)，運用紅外、紫外、液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)、核磁共振氫譜及碳譜等波譜技術(shù)鑒定化合物結(jié)構(gòu);通過MTT法研究dictamnin A、dictamninB、如忒文、黃柏酮、梣酮、檸檬苦素、fraxinellonone、白鮮堿8種化學成分對人肺癌細胞A549增殖的抑制作用，通過PI染色法研究化合物dictamnin A、B對A549細胞周期的影響;采用高效液相色譜技術(shù)建立同時測定白鮮皮中檸檬苦素、黃柏酮、梣酮三種活性成分

3、含量的方法，通過測定甲醇，乙醇，二氯甲烷，丙酮，乙腈5種不同提取溶劑中這三種活性成分的提取得率，確定最優(yōu)提取溶劑，優(yōu)化提取工藝。
　　結(jié)果:從白鮮皮中共分離19個化合物，其中鑒定了17個化合物，分別是dictamninA(Ⅰ)，dictamnin B(Ⅱ)，梣酮(Ⅲ)，檸檬苦素(Ⅳ)，fraxinellonone(Ⅴ)，如忒文(Ⅵ)，黃柏酮(Ⅶ)，白鮮堿(Ⅷ)，3β-羥基-膽甾-5-烯(Ⅸ)，5-羥甲基糠醛(Ⅹ)，蘆丁(Ⅺ)，槲皮

4、素(Ⅻ)，東莨菪內(nèi)酯(ⅩⅢ)，胡蘿卜苷(ⅩⅣ)，β-谷甾醇(ⅩⅤ)，dasycarine(ⅩⅥ)，7α-obacunyl acetate(ⅩⅦ)。化合物(ⅩⅧ)～(ⅩⅨ)的結(jié)構(gòu)尚在解析和鑒定中。其中化合物(Ⅰ)，(Ⅱ)為新化合物?；衔?Ⅸ)，(Ⅹ)為首次從白鮮屬中分離得到。
　　通過MTT法研究8個化合物對人肺癌細胞A549的細胞毒作用，結(jié)果表明dictamninA、dictamnin B均具有較強細胞毒作用，白鮮堿次之，黃柏酮

5、、如忒文、fraxinellonone、檸檬苦素活性較弱、梣酮無活性;通過PI染色法進一步探討化合物dictamnin A、dictamninB對人肺癌細胞A549細胞周期的影響，實驗結(jié)果表明dictamnin A、B可明顯改變A549的細胞周期，表現(xiàn)為G1期細胞數(shù)量明顯高于對照組(70.1％)，分別為85.5％及85.1％，說明dictamnin A、B通過作用于A549細胞的G1期，從而抑制細胞周期的進程，促進細胞凋亡。
　　

6、首次建立對白鮮皮中檸檬苦素、黃柏酮、梣酮三種主要成分同時進行含量測定的高效液相色譜方法，并通過測定甲醇、乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙腈5種提取溶劑中三種成分的含量確定最優(yōu)提取溶劑，結(jié)果表明最佳提取溶劑為甲醇。
　　結(jié)論:從白鮮皮中分離并鑒定17個化合物，化合物(Ⅰ)及(Ⅱ)為新化合物，化合物(Ⅸ)、(Ⅹ)為首次從白鮮屬中分離得到;對人肺癌細胞A549，化合物dictamnin A，dictamnin B均具有較強細胞毒作用，白鮮堿次之