貴陽(yáng)蚋類幼蟲寄生性索蟲的初步研究.pdf

1、目的：利用DNA條形碼研究貴陽(yáng)市蚋類幼蟲感染索科線蟲的情況。
　　方法：（1）標(biāo)本來(lái)源：選取貴陽(yáng)市區(qū)內(nèi)十個(gè)標(biāo)本采集點(diǎn)，在七月、八月和九月三個(gè)月時(shí)間做三次重復(fù)采集。（2）標(biāo)本處理：常規(guī)固定并形態(tài)學(xué)鑒定蚋類成熟蛹的種屬，獲得貴陽(yáng)蚋類分布的本底資料；體視鏡下篩查并分離蚋類幼蟲寄生性索蟲，描述索蟲形態(tài)特征。（3）貴陽(yáng)蚋類DNA條形碼參考樹(shù)的建立：依據(jù)形態(tài)學(xué)分類結(jié)果，取不同種群不同種屬的蚋類各三個(gè)提取DNA，PCR擴(kuò)增特異性COI基因并測(cè)序

2、，用NJ法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，組建貴陽(yáng)蚋類DNA條形碼參考樹(shù)。（4）索蟲的分子鑒定：提取索蟲DNA，PCR擴(kuò)增COI基因和18S rDNA并測(cè)序，參照GenBank和BOLD數(shù)據(jù)庫(kù)上索蟲序列，與實(shí)驗(yàn)中所得序列用NJ法共同構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，從而鑒定索蟲種屬。（5）宿主蚋類的鑒定：提取宿主DNA，PCR擴(kuò)增特異性COI基因并測(cè)序，用貴陽(yáng)蚋類DNA條形碼參考樹(shù)鑒定宿主蚋種屬。
　　結(jié)果：貴陽(yáng)蚋類分布包括蚋屬5亞屬7種，分別是維蚋亞屬、紡蚋亞屬

3、、短蚋亞屬、蚋亞屬和厭蚋亞屬。十個(gè)采集點(diǎn)中有青巖和大凹兩個(gè)點(diǎn)的蚋幼蟲檢出有索蟲的寄生，分別檢出索蟲65條和60條,其中包括112條寄生期索蟲和13條寄生后期索蟲。通過(guò)系統(tǒng)發(fā)育分析鑒定，共有兩種索蟲，一種屬于中索屬，一種屬于胃索屬，其宿主分別是五指山蚋和興義維蚋。
　　結(jié)論：經(jīng)調(diào)查貴陽(yáng)蚋類幼蟲體內(nèi)有兩種索蟲寄生，一種是寄生于興義維蚋的胃索屬線蟲Gastromermis sp.；另一種是寄生于五指山蚋的中索屬線蟲 Mesomermis