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1、揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文豬發(fā)情周期雌激素受體α(ERα)基因表達(dá)豐度及E區(qū)cDNA克隆研究姓名:丁利軍申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):動物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師:丁家桐20050601Abundanceanalysisofestrogenreceptoralpha(ERa)mRNAinporcinethroughoutthemenstrualcycleandexpressingofEdomaincDNAMScandidate:DingLijunSu
2、pervisor:ProfDingJiatong(AnimalScienceandTechnologyCollege,YangzllouUniversity225009)AbstractXiaoMeishangiItswithdifferentEI池genotype(hA,AB,BB)identifiedbyRTPCRtechnique,wereslaughteredtostudyreproductiveparametersNodiff
3、erenceinovaryweightuterusweight,ovarylength,ovarywidthanduterinehornlengthweredetected(PO05)EstruscyclelengthwasnotaffectedbyERagenotype(PO05)Furthermore,nipplenumberswerenotdifferentforthreegenotypes(P005)Inordertoinves
4、tigatelocalizationandquantitativeexpressionofERamRNAinovaryanduterusofporcineonDay2,7,12,17throughoutmensmmlcycle,nonradioactiveinsituhybridizationusingDIGlabelledoligonucleofideprobeswasappliedIntheporcineovarypositives
5、ignalsforERawerelimitedexclusivelytothegranulosecellsofalltypesoffolliclesandwerepresentinafewcellsofearlycorporaluteaExpressionofERamRNAinovaryremainedlOWduringthewholeoestruscyclebutincreasedonDay17ERapositivesignalswe
6、remainlydetectedinglandularepithelialcells,afeWpartofstromalcellsandsmoothmusclecellsintheuterusChangesofERamRNAinporcineendometrittmwerehighlymenstrualcycledependentExpressionofERamRNAonDay17oftheocstruscyclewassignific
7、anthigherthanthatofDay12rPO01)E2concentrationsofserumweremeasuredbyradioimmtmoassy(RIA)onDay2,7,12,17ofthemenstrualcycleThelevelsofERamRNAsynchronized、viththechangesofestrogenwithpositivelyrelations(P20042)PartialEdomain
8、eDNAforporcineERagenewasamplifiedfromXiaoMeishan‘piguterusTheeDNA,546bp,encodedapeptideof182aminoacidswithapredictedmolecularweightof211KDaandpotentialestrogenbindingabilityTheaminoacidsequenceoftheporcineERaEdomainwas97
9、3%,978%,967%,and951%identicaltothatofhuman,cattle,sheepandchickenTheporcineERageneEdomaincDNAwasamplifiedfromrecombinantplasmidpGEMTERaEusingPCRtechnique,andthentransclonedintotheprokaryoticexpressionvectorpGEX一6p一1ERaEf
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