
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文檔簡介
1、普通小麥(Triticum aestivum L.,2n=6x=42,AABBDD)遺傳基礎狹窄限制了其產量的提高和品質的改良。冰草(Agropyron cristatum.,2n=4x=28,PPPP)6P染色體攜帶有多花多粒產量相關性狀,以及抗葉銹、白粉等抗病基因,將其導入普通小麥是增加小麥遺傳多樣性、增強小麥抗病性、提高小麥產量的有效途徑。本研究以小麥-冰草6P二體異附加系4844-12為基礎材料,通過γ射線輻照的方法,利用分子細
2、胞遺傳學技術,創(chuàng)制冰草6P染色體缺失系和小麥-冰草6P異源易位系。
1、一種高效誘導小麥-冰草6P異源易位方法:通過選擇合適的誘變參數(shù)(輻照劑量為20 Gy,劑量率為0.5 Gy/min),對處于開花期的小麥-冰草6P二體異附加系4844-12植株進行輻照,對獲得的誘變后代進行基因組原位雜交檢測(GISH),從中篩選小麥-冰草6P易位系,易位頻率超過10%。
2、冰草6P染色體分子標記圖譜構建:利用高效誘導小麥-冰草
3、異源易位方法,獲得了一系列冰草6P染色體缺失系和小麥-冰草6P易位系,在此基礎上,構建了冰草6P染色體分子標記圖譜。本研究將255個6P特異STS標記定位到31個染色體區(qū)段上:119個STS標記將6P短臂劃分為14個區(qū)段,136個STS標記將6P長臂劃分為17個區(qū)段。同時,將13個6P特異SLAF標記定位到相應染色體區(qū)段上,其中3個 SLAF標記被定位到6P短臂,10個SLAF標記位于6P長臂。
3、冰草6P染色體缺失系的獲得
4、與分類:利用殺配子染色體和輻照誘導的方法,獲得31個冰草6P染色體缺失系。通過GISH與分子標記圖譜檢測方法,根據(jù)攜帶6P遺傳成分的異同,將31個缺失株系劃分為18個類型:8個長臂缺失系(短臂端體)、5個長臂末端缺失系(含6P短臂)、1個長臂臂間缺失系(含6P短臂)、3個長臂末端缺失系(不含6 P短臂)、2個長臂臂間缺失系(不含6P短臂);6個短臂缺失系(長臂端體)、5個短臂末端缺失系(含6P長臂)和1個短臂末端缺失系(不含6P長臂)。
5、目前,已獲得自交 F7、M7和 M3代自交世代、BC3F1回交世代及BC2F2回交自交世代種子。
4、小麥-冰草6P異源易位系的分子細胞學檢測:通過高效誘導方法,本研究獲得一系列小麥-冰草6P易位系,通過多代回交與檢測,目前得到66個小麥-冰草6P易位系,最高回交世代為BC3F1代,回交自交BC2F2代。對其中31個易位株系進行了FISH與分子標記檢測:共涉及小麥6個部分同源群的12條染色體與冰草6P染色體發(fā)生重組:17、5和
6、9個株系與小麥 A、B和D組染色體發(fā)生易位,參與易位的小麥染色體有1A、4A、5A、6A、7A、1B、5B、7B、1D、3D、5D和6D。31個易位株系攜帶6P染色體不同/重疊區(qū)段,覆蓋整條6P染色體:15個易位株系攜帶6P短臂或部分短臂區(qū)段,9個株系攜帶6P長臂或部分長臂區(qū)段,7個易位株系同時攜帶6P短臂和長臂部分區(qū)段。并且,對7個整臂易位系和1個著絲粒融合小片段易位系進行了著絲粒鑒定:4個整臂株系攜帶冰草著絲粒,3個整臂易位株系攜帶
7、小麥著絲粒,1個著絲粒融合小片段易位系同時攜帶冰草和小麥著絲粒,為雙著絲粒易位。
5、冰草6P染色體缺失系和小麥-冰草6P易位系農藝性狀初步分析:通過對6P染色體缺失系多代穗部性狀調查,長臂端體結實要好于短臂端體,推測6P染色體長臂攜帶有控制多粒性狀的主效位點;31個小麥-冰草6P易位系中4個易位株系表現(xiàn)高穗粒數(shù)、1個易位株系表現(xiàn)高千粒重、3個易位株系同時表現(xiàn)高穗粒數(shù)和高千粒重性狀。除產量相關性狀外,利用冰草6P染色體缺失系,
8、將6P來源的抗葉銹病基因定位到短臂末端區(qū)6PS-0.81-1.00。15個攜帶該區(qū)段的小麥-冰草6P易位系對葉銹病表現(xiàn)為抗病。
本研究建立了一種高效誘導小麥-冰草6P異源易位方法,為小麥與其他近緣植株基因組間異源易位系的創(chuàng)制提供借鑒;構建了冰草6P染色體分子標記圖譜,為小麥背景下6P特定染色質區(qū)段的快速追蹤與檢測提供分子標記;獲得的冰草6P染色體缺失系,為6P優(yōu)異基因的染色體區(qū)段定位及結構與功能分析提供遺傳材料;創(chuàng)制了不同類型
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