添加甘藍(lán)8號(hào)染色體片段的大白菜易位系的獲得及其遺傳穩(wěn)定性分析.pdf

1、為創(chuàng)建大白菜—結(jié)球甘藍(lán)易位系，本試驗(yàn)以大白菜—結(jié)球甘藍(lán)8號(hào)單體異附加系(AC8)為試材，采用60Co-γ射線對(duì)其花粉進(jìn)行輻射，對(duì)輻射后獲得的M1植株進(jìn)行自交和回交，并對(duì)自交和回交后代進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)，同時(shí)對(duì)M2自交獲得M3。利用InDel分子標(biāo)記對(duì)輻射M3代和M1自交與回交后代小孢子植株進(jìn)行鑒定，結(jié)合細(xì)胞學(xué)觀察，獲得了兩個(gè)添加甘藍(lán)8號(hào)染色體片段的大白菜易位系‘AT8-1’與‘AT8-2’，并對(duì)易位系后代進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性分析、田間性狀調(diào)查

2、和營養(yǎng)品質(zhì)分析，為大白菜育種提供了新的種質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.本試驗(yàn)通過對(duì)AC8輻射后代進(jìn)行小孢子培養(yǎng)和自交獲得后代群體，利用實(shí)驗(yàn)室篩出的286個(gè)結(jié)球甘藍(lán)相對(duì)于大白菜的特異InDel分子標(biāo)記對(duì)小孢子植株和自交后代進(jìn)行鑒定，結(jié)合染色體減數(shù)分裂觀察，獲得了2個(gè)添加甘藍(lán)8號(hào)染色體片段的大白菜易位系‘AT8-1’和‘AT8-2’。‘AT8-1’來自AC830Gy輻射M1回交后代的小孢子植株;‘AT8-2’來自AC830Gy輻射自

3、交后代M3。2個(gè)易位系的特異標(biāo)記均為甘藍(lán)C03連鎖群的10個(gè)連續(xù)標(biāo)記。同時(shí)對(duì)未經(jīng)輻射的AC8自交后代中具有甘藍(lán)特異InDel標(biāo)記的植株進(jìn)行了小孢子培養(yǎng)，并對(duì)小孢子植株進(jìn)行了分子標(biāo)記鑒定，未能獲得具有甘藍(lán)特異標(biāo)記的小孢子植株。
　　2.大白菜易位系‘AT8-1’和‘AT8-2’具有相同的甘藍(lán)特異InDel標(biāo)記，為確定甘藍(lán)易位片段大小，對(duì)兩端的標(biāo)記進(jìn)行加密設(shè)計(jì)，加密后的PCR結(jié)果表明，2個(gè)大白菜易位系中外源染色體片段為甘藍(lán)03連鎖群3

4、1117882bp到57768834bp（連鎖群末端）之間，大小約為26651kb。
　　3.對(duì)大白菜易位系‘AT8-1’進(jìn)行自交、與二倍體大白菜親本回交，以及與2個(gè)不同大白菜自交系進(jìn)行雜交，利用InDel分子標(biāo)記鑒定易位系后代的遺傳穩(wěn)定性，結(jié)果表明該易位系中甘藍(lán)染色體片段不穩(wěn)定，‘AT8-1’自交后代中甘藍(lán)染色體片段的傳遞率為61.1％，回交后代中甘藍(lán)染色體片段的傳遞率為26.3％，兩個(gè)雜交后代群體分別為24.2％與30.0％。

5、易位系‘AT8-2’自交后代甘藍(lán)染色體片段的傳遞率為52.9％。2個(gè)易位系后代群體中均未見易位片段變小的植株。
　　4.對(duì)易位系‘AT8-1’后代進(jìn)行田間性狀調(diào)查和營養(yǎng)品質(zhì)測定。結(jié)果表明，‘AT8-1’后代可分為含甘藍(lán)染色體片段和不含甘藍(lán)染色體片段兩類，且每類植株性狀較為一致，驗(yàn)證了易位系白菜背景為純合。兩類植株在田間性狀和營養(yǎng)成分含量上有一定差異，易位系自交和回交后代中含甘藍(lán)易位片段的植株不結(jié)球，雜交后代中含甘藍(lán)易位片段植株的葉