氟離子對正畸用鎳鈦弓絲細(xì)胞毒性影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   觀察正畸用鎳鈦弓絲在不同含氟濃度的人工唾液環(huán)境下的細(xì)胞毒性的改變,評價氟化物對正畸用鎳鈦弓絲生物相容性的影響,為氟化物在正畸治療中安全有效地使用提供參考。
   方法:
   1、配制人工唾液和三種不同含氟濃度(0.05%、0.10%、0.20%)的人工唾液,選擇直徑為0.018英寸的國產(chǎn)鎳鈦絲(有研億金牌,原北京有色金屬研究總院產(chǎn))剪成3厘米長的小段作為實(shí)驗(yàn)樣本,共制備80個樣本。將它們分為(A,

2、B,C,D)四個組,每組20個樣本,在37℃人工唾液環(huán)境中浸泡28天。取出(B,C,D)三組樣本依次浸入含氟濃度為(0.05%、0.10%、0.20%)的人工唾液,3分鐘后取出,蒸餾水清洗后用濾紙吸干再放回原人工唾液中,每日早中晚各一次。A組為對照組樣本,直接浸泡在人工唾液中不做此處理。
   2、28天后將以上四組樣本從人工唾液中取出,消毒干燥后加入RPMI-1640培養(yǎng)基,制備浸提液。將以上四組浸提液和陰性對照液、陽性對照液

3、分別進(jìn)行L929小鼠成纖維細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)48小時后對細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察,并采用MTT法測定各組吸光值,計(jì)算相對增殖率,以評價各組材料的細(xì)胞毒性。采用流式細(xì)胞AnnexinV-FTTC/PI雙染法對各組浸提液培養(yǎng)的L929小鼠成纖維細(xì)胞進(jìn)行檢測,觀察各組正常細(xì)胞、早期凋亡細(xì)胞、晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的分布差異,并繪制散點(diǎn)圖。
   結(jié)果:
   1.MTT結(jié)果顯示A組(弓絲未經(jīng)氟化處理)的細(xì)胞毒性為1級;B組和C組(弓絲分別

4、經(jīng)0.05%和0.10%氟化人工唾液處理組)的細(xì)胞毒性均為1級;D組(弓絲經(jīng)0.20%氟化人工唾液處理組)的細(xì)胞毒性為2級;陰性對照組為0級;陽性對照組為4級。
   2.流式細(xì)胞儀散點(diǎn)圖顯示,陰性組中細(xì)胞主要為正?;罴?xì)胞;A、B和C組(弓絲未經(jīng)氟化處理組、弓絲分別經(jīng)0.05%和0.10%氟化人工唾液處理組)中細(xì)胞主要為正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞;D組(弓絲經(jīng)0.20%氟化人工唾液處理組)中細(xì)胞狀態(tài)己發(fā)生較大改變,主要為早期凋亡細(xì)胞

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