反枝莧對(duì)咪唑乙煙酸的靶標(biāo)位點(diǎn)抗藥性.pdf

1、隨著化學(xué)除草劑的長(zhǎng)期、大面積使用，我國(guó)農(nóng)田雜草抗藥性發(fā)展越來(lái)越嚴(yán)重。反枝莧(Amaranthus retroflexusL.)是我國(guó)常見(jiàn)雜草，廣泛分布于農(nóng)田、果園、荒地，反枝莧的為害可使大豆減產(chǎn)20％以上。咪唑乙煙酸屬乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制劑類除草劑，主要用于防除大豆田闊葉雜草，在我國(guó)大豆主產(chǎn)區(qū)連續(xù)使用數(shù)十年后，部分省市在推薦劑量下出現(xiàn)了反枝莧防治失敗的情況。為明確反枝莧對(duì)咪唑乙煙酸的抗性水平及抗性機(jī)理，本研究以采自黑龍江、吉林、

2、安徽、內(nèi)蒙古、新疆五省市的12個(gè)反枝莧種群為試材，通過(guò)單劑量甄別確定采自黑龍江的3個(gè)反枝莧種群對(duì)咪唑乙煙酸產(chǎn)生了抗藥性，并以其為材料研究了其抗藥性機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)單劑量甄別抗藥性:與敏感性反枝莧種群13-76相比，種群13-03、13-17和12-39鮮重抑制率在20％以下，為咪唑乙煙酸抗藥性種群。
　　(2)抗藥性水平測(cè)定:劑量反應(yīng)曲線擬合結(jié)果表明，種群13-03、13-17和12-39抗藥性指數(shù)均在1

3、0以上。其中，采自黑龍江嫩江縣和黑龍江嫩北農(nóng)場(chǎng)的反枝莧種群12-39、13-17抗藥性指數(shù)超過(guò)90;采自黑龍江九三山河農(nóng)場(chǎng)的反枝莧種群13-03抗藥性指數(shù)為14.51。
　　(3) ALS離體活性測(cè)定:抗藥性種群ALS對(duì)咪唑乙煙酸的敏感性降低。抗藥性反枝莧種群13-03和13-17對(duì)咪唑乙煙酸的抑制中濃度(I50)與敏感性種群13-76的比值分別為14.83和15.27，而與抗藥性種群12-39的比值達(dá)到268。說(shuō)明反枝莧體內(nèi)AL

4、S敏感性降低是抗藥性產(chǎn)生的原因之一。
　　(4)分子檢測(cè):與敏感性反枝莧種群13-76的ALS基因序列相比，抗藥性反枝莧種群13-03、13-17和12-39在ALS基因序列的保守區(qū)域發(fā)生了不同位點(diǎn)的突變，分別為205位GCT突變?yōu)镚TT，653位AGC突變?yōu)锳CC，574位TGG突變?yōu)門(mén)TG，分別導(dǎo)致丙氨酸被纈氨酸取代，絲氨酸被蘇氨酸取代，色氨酸被亮氨酸取代。
　　綜上所述，抗藥性反枝莧種群體內(nèi)ALS敏感性降低是其對(duì)咪唑乙