版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、繁殖是動(dòng)物生活史中最為重要的一個(gè)環(huán)節(jié),能否正常、順利地進(jìn)行繁殖,關(guān)系到物種的延續(xù)及物種的多樣性。由于爬行動(dòng)物處于動(dòng)物進(jìn)化過(guò)程中的特殊地位,是脊椎動(dòng)物最先登陸的類群,能否在陸上繁殖就成為進(jìn)一步發(fā)展的主要矛盾。因此,對(duì)此環(huán)節(jié)進(jìn)行深入研究顯得尤為重要。然而,有關(guān)中華鱉生殖特性方面的研究鮮有報(bào)道。中華鱉(Pelodiscus sinensis)是龜鱉目鱉科的代表動(dòng)物之一,是我國(guó)重要的特種水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,具有重要的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。在生殖周期中,
2、由于中華鱉具有典型的冬眠現(xiàn)象和精子儲(chǔ)存的生理學(xué)特征,是研究爬行動(dòng)物生殖生物學(xué)的理想模式動(dòng)物。本文首先對(duì)中華鱉精子的超微結(jié)構(gòu)及其變態(tài)發(fā)生過(guò)程進(jìn)行了觀測(cè),進(jìn)而探究了生精上皮細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)的年周期變化以及在這個(gè)過(guò)程中細(xì)胞增殖和凋亡動(dòng)態(tài)。在此基礎(chǔ)上探討了激素受體在相關(guān)生殖器官(由于雌性的輸卵管具有精子儲(chǔ)存功能,所以也在此一并研究)的分布規(guī)律。研究結(jié)果將從細(xì)胞和分子水平闡明雄性中華鱉生殖生物學(xué)特性,并為中華鱉的繁殖、保護(hù)及資源利用等應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)
3、。 試驗(yàn)I:中華鱉精子的超微結(jié)構(gòu)研究應(yīng)用透射電鏡和掃描電鏡技術(shù)觀察了中華鱉精子的超微結(jié)構(gòu)。成熟的精子由頭部、連接段、中段、主段和末段組成。頭部呈細(xì)長(zhǎng)的錐體狀,細(xì)胞核前1/3為核前突,表面被頂體復(fù)合體覆蓋。頂體下錐直接包繞核前突,頂體帽與頂體下錐之間為頂體下間隙。3~5條縱行的核內(nèi)小管與頂體下錐頭端的桿狀物相延續(xù)。連接段位于核后窩內(nèi),由縱行短的節(jié)柱組成。中段由中央的中心粒和周?chē)木€粒體鞘組成。線粒體鞘由7~8圈線粒體環(huán)形排列而成,
4、每圈約有5個(gè)線粒體,上、下層線粒體錯(cuò)位1/2排列。線粒體形態(tài)為8-10層排列的同心圓狀,其平行的板層實(shí)為長(zhǎng)而彎曲分布的線粒體嵴。這種線粒體嵴和細(xì)胞內(nèi)大量的糖元顆粒,與中華鱉成熟精子長(zhǎng)時(shí)間貯存并保持活力有關(guān)。線粒體鞘末端的楔形終環(huán)明顯。近-遠(yuǎn)端中心粒相互垂直排列。近端中心粒的結(jié)構(gòu)模式是9×3+0,管壁三聯(lián)微管呈典型的風(fēng)車(chē)狀。遠(yuǎn)端中心粒的結(jié)構(gòu)模式為9×3+2,中央微管和外周三聯(lián)微管周?chē)c致密纖維重合排列,前部的外周致密纖維相互融合成連續(xù)的
5、一圈,向后各致密纖維逐漸分離。主段具有發(fā)達(dá)的環(huán)行纖維鞘,前厚(數(shù)層)后薄(一層)。中央的軸絲復(fù)合體呈9×2+2,在與第3和第8號(hào)二聯(lián)微管相對(duì)的部位可見(jiàn)兩條與纖維鞘融合的縱行纖維。橫切面上,主段二聯(lián)微管A管上的動(dòng)力臂明顯,兩條中央微管間有短的橫橋連接,中央微管通過(guò)放射狀輻與二聯(lián)微管A管相連。末段僅由軸絲復(fù)合體和表面的細(xì)胞膜組成,其中的微管逐漸分散成單個(gè)排列。中華鱉精子的結(jié)構(gòu)在一些細(xì)節(jié)和數(shù)量上與龜鱉目的海龜和烏龜存在一定差異,更與其它綱動(dòng)物
6、和龜鱉目之外的其它爬行動(dòng)物差異明顯。 試驗(yàn)II:中華鱉精子的形成應(yīng)用透射電鏡技術(shù)觀察了中華鱉精子的形成過(guò)程。精子的形成過(guò)程包括細(xì)胞核的拉長(zhǎng)、染色質(zhì)的濃縮、頂體和鞭毛的形成、細(xì)胞質(zhì)的排除。第I期,前頇體泡形成并移向細(xì)胞核一側(cè),同側(cè)核膜凹陷成淺窩。前頂體泡底部中央出現(xiàn)小的頇體顆粒,纖維物質(zhì)層位于核前端與前頂體泡底壁之間,其核膜一側(cè)的中央形成更小的頂體下顆粒,將與核內(nèi)小管的形成有關(guān)。細(xì)胞核開(kāi)始端移和變形。第II期,前項(xiàng)體泡變成扁囊狀覆
7、蓋于隆突的核頂端,頂體顆粒彌散成中等電子致密物分布于頂體帽中,纖維物質(zhì)層發(fā)育為頂體下錐。環(huán)形核套微管在頂體后端的核周?chē)饾u形成,核內(nèi)染色質(zhì)開(kāi)始濃縮成圓形顆粒,伴隨著細(xì)胞核的偏移,細(xì)胞質(zhì)開(kāi)始發(fā)生重排。第III期,拉長(zhǎng)的細(xì)胞核前端凸出,表面有頂體復(fù)合體覆蓋,變態(tài)的精子頭部扎在支持細(xì)胞的凹陷中,核后端最寬并出現(xiàn)植入窩,染色質(zhì)進(jìn)一步濃縮。線粒體向后拖移位于細(xì)胞核的后端,許多微管開(kāi)始組裝成鞭毛的軸絲復(fù)合體。第IV期,染色質(zhì)濃縮成致密均質(zhì)物,環(huán)形核
8、套微管先后改建為斜行和縱行核套微管,支持細(xì)胞突起形成“袖領(lǐng)”包繞頂體。多余的細(xì)胞質(zhì)后拖,形成與頭部和中段相連的胞質(zhì)葉,它逐漸的脫落排除。第V期,精子的頭部開(kāi)始成熟,核套微管解聚而消失,頂體周?chē)摹靶漕I(lǐng)”也消失。線粒體開(kāi)始排列在近端中心粒和遠(yuǎn)端中心粒周?chē)?,在線粒體的后端,纖維鞘環(huán)繞在鞭毛軸絲復(fù)合體的周?chē)?試驗(yàn)III:中華鱉睪丸和附睪形態(tài)結(jié)構(gòu)的年周期變化應(yīng)用組織學(xué)方法,對(duì)性成熟雄性中華鱉睪丸、附睪在年周期中的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行了較系
9、統(tǒng)的觀察和分析,以揭示其生殖的年周期變化規(guī)律。結(jié)果表明:中華鱉睪丸的年周期活動(dòng)由7個(gè)特征明顯的時(shí)期構(gòu)成。4月份為第I期,為精原細(xì)胞的增殖期;5~6月份是精原細(xì)胞復(fù)蘇、增殖、分化形成精母細(xì)胞時(shí)期,為第II期;7~8月份為第III期,是精母細(xì)胞分裂成為精細(xì)胞時(shí)期;9~10月份是精子形成期,大量的精子細(xì)胞變態(tài)成為成熟的精子,此期為IV期;11月份為第V期,生精上皮主要由精原細(xì)胞和大量的精子組成,精母細(xì)胞基本上已消耗完;12月至次年1月份為第V
10、I期,精子發(fā)生漸趨停滯,只有殘留的少量精子。2月份為第VII期,精子發(fā)生已經(jīng)停滯。睪丸系數(shù)和附睪系數(shù)的季節(jié)性變化反應(yīng)了雄性中華鱉的生殖年周期規(guī)律,而且與組織學(xué)觀察結(jié)果相一致。中華鱉精子產(chǎn)生限定在一年內(nèi)的特定階段,雄性產(chǎn)生精子與雌性的排卵及受精間是異相的。因此,中華鱉的生精類型屬于分離型模式,而且精子發(fā)生的模式是時(shí)間性的發(fā)育模式,明顯與鳥(niǎo)類和哺乳類不同。 試驗(yàn)IV:中華鱉繁殖周期中生精細(xì)胞的增殖和凋亡應(yīng)用電鏡技術(shù)、增殖細(xì)胞核抗原(
11、PCNA)以及脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TUNEL),研究了繁殖期和非繁殖期生精上皮細(xì)胞的增殖和凋亡情況。PCNA免疫組織化學(xué)反應(yīng)顯示:在7月、9月(繁殖期)精原細(xì)胞和初級(jí)精母細(xì)胞的細(xì)胞核都呈陽(yáng)性反應(yīng);12月、1月(非繁殖期)大部分的精原細(xì)胞和少量的初級(jí)精母細(xì)胞呈陽(yáng)性,但繁殖期初級(jí)精母細(xì)胞的陽(yáng)性率比非繁殖期的高很多。TUNEL法標(biāo)記的大量凋亡細(xì)胞出現(xiàn)在12月、1月份的曲細(xì)精管中,其中大量的初級(jí)精母細(xì)胞和少量的精子細(xì)胞發(fā)
12、生凋亡,并且這種陽(yáng)性細(xì)胞在整個(gè)生精停滯期(非繁殖期)都存在,但生精期幾乎未見(jiàn)任何的凋亡細(xì)胞。初級(jí)精母細(xì)胞是主要的凋亡細(xì)胞類型。電鏡下所見(jiàn)的凋亡細(xì)胞同樣發(fā)生在非繁殖期,核染色質(zhì)固縮邊聚,呈半月形、環(huán)形、球形或不規(guī)則形高電子密度的濃縮核,有的凋亡細(xì)胞出現(xiàn)凋亡小體。而繁殖期各級(jí)生精上皮細(xì)胞器結(jié)構(gòu)完整,核呈均質(zhì)狀,胞質(zhì)無(wú)濃縮現(xiàn)象。制作超薄切片時(shí)保留半薄切片,甲苯胺蘭染色,光鏡觀察在非繁殖期也看到凋亡現(xiàn)象?;谝陨系慕Y(jié)果,我們認(rèn)為初級(jí)精母細(xì)胞和精
13、子細(xì)胞的凋亡是非繁殖期生精上皮損失的主要原因,并且正常的季節(jié)改變對(duì)中華鱉生精上皮細(xì)胞具有時(shí)間和空間特殊性。 試驗(yàn)V:雄激素受體和雌激素受體α在中華鱉生殖器官中的分布首次用雄激素受體(Androgen receptor,AR)和雌激素受體α(Estrogen receptorα,ERα)的多克隆抗體在中華鱉睪丸、附睪和輸卵管中進(jìn)行免疫組織化學(xué)定位研究。結(jié)果表明,特異性AR免疫陽(yáng)性反應(yīng)見(jiàn)于睪丸的間質(zhì)細(xì)胞、肌樣細(xì)胞、支持細(xì)胞、精原細(xì)胞
14、、精母細(xì)胞和精子細(xì)胞。雄激素受體在中華鱉生精細(xì)胞中的階段性表達(dá)表明,它與相應(yīng)的激素結(jié)合后,調(diào)節(jié)精子發(fā)生,可能與精原細(xì)胞的增殖、精母細(xì)胞的成熟分裂及精子形成密切相關(guān)。雌激素受體α主要表達(dá)于睪丸的間質(zhì)細(xì)胞,生精細(xì)胞只在生精活躍期呈弱陽(yáng)性反應(yīng),表明雌激素主要通過(guò)體細(xì)胞起調(diào)節(jié)作用,而它在生精細(xì)胞中階段性分布表明它也可以直接調(diào)節(jié)生精細(xì)胞。由于雌性中華鱉的輸卵管具有精子儲(chǔ)存功能,在此與雄性生殖器官一并進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)這兩種類固醇激素受體在中華鱉輸卵
15、管內(nèi)均有陽(yáng)性分布,主要表達(dá)于上皮細(xì)胞腔面、腺細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞,表明它們可能均與精子的儲(chǔ)存及輸卵管的腺體分泌有關(guān)。 試驗(yàn)VI:中華鱉睪丸雄激素受體mRNA的表達(dá)采用原位雜交技術(shù)(In situhybridization,ISH)研究雄激素受體mRNA在中華鱉睪丸的存在及細(xì)胞定位。取10只健康成年中華鱉的睪丸,進(jìn)行冰凍切片。用地高辛標(biāo)記的寡核苷酸探針對(duì)組織切片進(jìn)行原位雜交,檢測(cè)雄激素受體mRNA在睪丸組織細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)定位。結(jié)果顯示:大
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 中華鱉(Pelodiscus sinensis)附睪微環(huán)境及其精子生物學(xué)特性的研究.pdf
- 降低中華鱉(Pelodiscus sinensis)配合飼料中魚(yú)粉水平的研究.pdf
- 中華鱉(Pelodiscus sinensis)心臟源成纖維細(xì)胞系的建立、鑒定以及應(yīng)用研究.pdf
- 杉木生殖生物學(xué)特性研究.pdf
- 樹(shù)莓生殖生物學(xué)特性研究.pdf
- 白花樹(shù)生殖生物學(xué)特性研究.pdf
- 冷蒿種子生物學(xué)及生殖生物學(xué)特性的研究.pdf
- PLZF對(duì)奶山羊雄性生殖干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf
- 揚(yáng)子鱷(Alligator sinensis)和中華鱉(Trionyx sinensis)的Sox基因研究.pdf
- 浙江紅山茶生殖生物學(xué)特性研究.pdf
- 野生櫻桃李生殖生物學(xué)特性初步研究.pdf
- 青島百合生殖生物學(xué)特性研究.pdf
- 中華原鉤蝦(Eogammarus sinensis)繁殖發(fā)育生物學(xué)與生態(tài)學(xué)初步研究.pdf
- 大豆生殖生物學(xué)研究.pdf
- 樟樹(shù)生殖生物學(xué)研究.pdf
- 桔梗生殖生物學(xué)研究.pdf
- 文冠果生殖生物學(xué)與傳粉生物學(xué)的研究.pdf
- 中華通草蛉滯育發(fā)育中的生殖生物學(xué)研究.pdf
- 藥用昆蟲(chóng)中華真地鱉發(fā)育生物學(xué)和生殖生理研究.pdf
- 圓齒野鴉椿生殖生物學(xué)特性研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論