29304.擬南芥phi1基因的克隆與功能研究

1、南京大學碩士畢業(yè)論文：擬南芥phi一，基因的克隆與功能研究摘要要3Abstract41綜述611植物的磷酸營養(yǎng)612植物對低磷酸脅迫的反應613煙草BY2細胞是研究磷吸收很好的材料714磷酸誘導基因phi—J『的發(fā)現(xiàn)和功能研究進展7141磷酸誘導基因phiJf的發(fā)現(xiàn)7142陸地棉磷酸誘導基因phi—J『815相關基因的功能研究9151磷酸誘導基因phi29152生長素誘導基因arcA10153EXORDIUM基因11154馬鈴薯基因er

2、g1122材料與方法1321引言1322實驗材料與方法14221材料與試劑14222實驗方法15223GUS組織化學分析213結(jié)果與分析2331目的基因的克隆與序列分析測定23311phiJ『編碼區(qū)序列的克隆與序列分析23312phiJ啟動子片段的克隆和序列測定2532植物轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建26321phi—J過量表達載體pCAMBIAl301二CDS的構(gòu)建26南京大學碩士畢業(yè)論文：擬南芥腫f，基因的克隆與功能研究2QQ2級碩士生姓名：張姣

3、摘要磷酸饑餓處理煙草BY2培養(yǎng)細胞3d，能使細胞周期停滯而處于G1期。加入磷酸后能夠誘導phiJ的短暫表達而促使細胞從停滯狀態(tài)重新進入細胞周期，從phi一』的表達模式看，phi，并不是細胞周期的調(diào)控基因，而是能是細胞從停滯狀態(tài)重新進入細胞周期。目前關于phiJ『的表達特性以及功能了解不多。為了研究phi—J的表達特性以及對擬南芥生長發(fā)育的影響，我們利用pCAMBIA載體中CaMV35S啟動子、GUS基因分別與phi』編碼區(qū)序列、phiJ

4、基因的啟動子區(qū)及上游調(diào)控序列構(gòu)建了phiJ過量表達載體、phi—JGUS植物轉(zhuǎn)化載體。研究結(jié)果表明，過量表達的轉(zhuǎn)基因株系促進了初生根和下胚軸的伸長，但對根毛區(qū)的發(fā)育和側(cè)根的形成無顯著影響。過量表達也促進了擬南芥的發(fā)育，表現(xiàn)為早熟。觀察不同生長期的陽性轉(zhuǎn)化植株GUS活性的分布情況，并與野生型做對比，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系葉原基、分化中的氣孔保衛(wèi)細胞、分化中的葉表皮毛、根的成熟區(qū)、幼嫩器官中的維管束等部分有GUS表達；而且還發(fā)現(xiàn)在同一器官中，不同組