閩江福州段水體病毒的檢測.pdf

1、福建農(nóng) 林大 學 碩士 學位論文 — 摘要摘要本研 究選取 了具有代表性 的植物病毒 中的煙草花葉病毒( T o b a c c o m o s a i c v i r u s , T M V ) 和動 物病毒中 的 腸 道病毒 扭 n t e r o v i r u s )和輪狀病毒( R o i a v i r u s ) 作為檢測對象， 對閩江福州段進行了 水體 病毒的檢測。利 用 化 學 凝 聚 法 濃 縮 水 樣 ， 應

2、 用 R T - P C R ( r e v e r s et r a n s c r i p t i o n - p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n ) 技 術(shù)和傳統(tǒng)生 物學方 法， 從濃 縮水 樣中以 及因 接種濃 縮水 樣而 發(fā) 病的 普通 煙 ( K 3 2 6 ) 的 葉片 中 擴增出與預期大小接近的 T M V的目 的片段: 在此基礎(chǔ)之上， 根據(jù)摩擦接 種、 電

3、 鏡 觀察 和酶 聯(lián) 免 疫 吸附 試驗( e n z y m e - l i n k e d i m m u n o s o r b e n ta s s a y , E L I S A ) 檢測的結(jié)果，最終確定在水體中 存在具有侵染性的T MV o. 臉泳同時也對水體中動物病毒的檢測作了初步探索。應用 R T - P C R技術(shù)，分別使用腸道病毒和輪狀病毒的引物，從濃縮 樣中擴增出與預期大小接近的目 的片段，目 前尚需要進一步

4、的實驗對結(jié)果加以驗證。在研究過程中，還對水樣的濃縮方法、從植物或者水樣中提取核酸的方法以及P C R反應的條件優(yōu)化做了一些探索和嘗試。本研究填補了閩江水體病毒檢測的空白，為進一步完善水體病毒 檢 測 方 法 、 拓 寬 檢 測 范 圍 奠 定 了 基 礎(chǔ) 。 夕 _關(guān)鍵詞: 水體病毒， 煙草花葉病毒， 腸道病毒， 輪狀病毒， R T - P C R福建農(nóng) 林大 學碩士 學位論文 — 前言1前言水是人類生存必需的物質(zhì)條件， 但目 前水資源

5、的匾乏和污染已經(jīng)成為 全球性的問 題: 水資 源一方面要滿足不斷增長的 人口 的生活需要， 另一方面又面臨著各種因素造成的嚴重污染。 近年來， 最為突出的污染問 題是工業(yè)廢水、 生活污水和農(nóng)業(yè)肥水導致的水資源富營養(yǎng)， 富營養(yǎng)的水體為各種病原的滋生造就了良 好的環(huán)境， 一旦病原進入， 就可能迅速增殖， 并隨水流傳遍整個水域， 造成病害的發(fā)生。病原進入水體的途徑有很多， 如病原攜帶者 ( 人或動物) 的排泄物、 農(nóng)作物病區(qū)的灌溉用水、 醫(yī)療

6、及科研院所等機構(gòu)排放的的廢水等。進入水體的病原種類繁多， 幾乎涵蓋了 所有的病原種類， 但其中 造成危害最大的只有細菌和病毒。以 前， 人們只認識到水體細菌的危害， 因此在水的凈化處理上強調(diào)了除菌步驟。 隨著人口的增長和人類活動的擴展，水體病毒在人類毫無防范的環(huán)境下肆意生長著， 它們造成的危害日 趨嚴重，因此， 水體病毒的檢測和處理工作逐漸引起了人們的關(guān)注。1 . 1水體病毒的 種類和危害1 . 1 . 1水體中的動物病毒目 前，己 在

7、水體中發(fā)現(xiàn)了 1 4 0 種以 上的血清型的病毒， 其中，輪狀病毒( R o t a v i r u s ) 、甲 肝病毒 ( H e p a t i t i s A l r r u s , H A V ) 、 杯 狀病毒( C a l i c i v i r u s ) . 腺病毒( A d e n o v i r u s ) 和腸 道病毒 ( E n t e r o v i r u s ) 對公 眾健 康 的 威 脅 最 大