地黃根際有益細(xì)菌篩選及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、地黃(Rehmannia glutinosa Libosch.)是玄參科(Scrophulariaceae)地黃屬多年生草本植物，為我國(guó)栽培歷史最悠久的藥用植物之一，其塊根是一種大宗常用中藥材。在地黃栽培中，存在著嚴(yán)重的連作障礙，其原因至今不明。為了揭示導(dǎo)致連作障礙的原因，劉峰等從地黃適宜產(chǎn)區(qū)未種植過(guò)地黃的大田中分離了50株細(xì)菌，初步了解了其生物學(xué)特性，發(fā)現(xiàn)其水蘇糖利用能力和氰化物產(chǎn)生能力差異顯著。這提示種植地黃后根際特殊的營(yíng)養(yǎng)狀況可能

2、會(huì)導(dǎo)致地黃根際微生態(tài)失衡，從而導(dǎo)致地黃連作障礙。 本文利用組織培養(yǎng)技術(shù)與盆栽試驗(yàn)，測(cè)試了各菌株對(duì)地黃試管苗和盆栽苗的影響，結(jié)合以前工作基礎(chǔ)初步確定了有益菌和有害菌；通過(guò)拮抗試驗(yàn)，評(píng)價(jià)了有益菌和有害菌之間的拮抗關(guān)系；揭示了生地提取液對(duì)地黃試管苗的自毒作用，并證明有益細(xì)菌對(duì)生地提取液自毒作用具有緩解效應(yīng)。主要研究結(jié)果如下： 1.不同菌株對(duì)地黃試管苗的生長(zhǎng)影響顯著。根據(jù)其作用效果，將細(xì)菌菌株分為四種類型：(1)促生菌，如6，2

3、3，24，28，29號(hào)菌，對(duì)地黃試管苗具有顯著促進(jìn)作用；(2)無(wú)顯著影響菌，如4，12，13，34，41號(hào)菌，對(duì)地黃各生理指標(biāo)均無(wú)顯著影響；(3)抑制菌，如3，15，18，35號(hào)菌，對(duì)地黃苗植株干鮮重、植株高均有顯著抑制作用；(4)致死菌，如11，26，37，48號(hào)菌，導(dǎo)致地黃苗死亡。 2.不同菌株對(duì)地黃盆栽苗的生長(zhǎng)影響顯著。其中，24號(hào)菌對(duì)植株干鮮重、根鮮重都有顯著的促進(jìn)作用，地黃苗壯，葉片大而厚，塊根較大且多；28、29、3

4、4號(hào)菌對(duì)植株干鮮重、根干重都有顯著的促進(jìn)作用，地黃苗壯，葉片大而厚，根塊根較大且多；可見24、28、29、34號(hào)菌具良好的促生作用。 3.細(xì)菌拮抗實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，有益菌與有害菌間存在拮抗關(guān)系。 4.本研究證明生地提取液對(duì)地黃試管苗具有顯著的自毒作用，MS培養(yǎng)基中添加生地提取液可導(dǎo)致試管苗產(chǎn)生氧化損傷，使SOD、CAT、POD、APX酶活性下降，而使PPO酶活性升高，但與對(duì)照相比無(wú)顯著性影響；導(dǎo)致不定根表皮細(xì)胞細(xì)胞壁木質(zhì)化、栓質(zhì)

5、化和角質(zhì)化。 5.本研究證明所選有益菌(6、7、21、23、24、28、29、34、43、45)對(duì)生地提取液的自毒作用具有顯著緩解作用。 綜上可知：土壤細(xì)菌對(duì)地黃的生長(zhǎng)具有顯著影響，生地提取液對(duì)地黃具有自毒作用，本研究所選有益菌對(duì)生地提取液的自毒作用具有顯著緩解作用。 本文的創(chuàng)新點(diǎn)： 1.首次揭示了不同土壤細(xì)菌對(duì)地黃試管苗和盆栽苗的影響； 2.首次揭示了生地提取液對(duì)地黃具有自毒作用； 3.