半夏軟腐病根際拮抗細(xì)菌的篩選及其鑒定.pdf

1、半夏是我國(guó)中藥寶庫(kù)中的大宗藥材,為解決供需矛盾和保護(hù)野生資源,我國(guó)從20世紀(jì)70年代開(kāi)始半夏野生變家種及其栽培技術(shù)研究。半夏軟腐病是由胡蘿卜果膠桿菌(Pectobacterium carotovora)引起的病害,該病發(fā)生普遍,嚴(yán)重威脅著半夏的規(guī)?；G色生產(chǎn)。本論文針對(duì)半夏生產(chǎn)中的主要病害--軟腐病,從生物防治途徑出發(fā),進(jìn)行了半夏軟腐病根際拮抗菌的分離、篩選及鑒定,以期為半夏的生物防治技術(shù)開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　 2006年6～10

2、月從浙江和山東兩省的半夏種植地采集根際土壤樣品,從這些樣品中分別分離細(xì)菌,獲得細(xì)菌分離物317個(gè)。對(duì)這些細(xì)菌分離物在培養(yǎng)平板上進(jìn)行拮抗篩選,得到拮抗菌10株。以半夏球莖及其切片為材料,對(duì)10株拮抗菌進(jìn)行了拮抗活性篩選,結(jié)果4個(gè)菌株顯著減輕半夏切片和球莖的軟腐病癥狀。選擇在球莖上具有較好生防效果(60％以上)的拮抗菌繼續(xù)在半夏組培苗上進(jìn)行復(fù)篩。結(jié)果,2個(gè)拮抗菌P-Y2-2和GJ1-8顯著抑制組培苗的軟腐病菌發(fā)生,防治效果分別為100.00

3、％和93.34％,但拮抗菌L1-5對(duì)組培苗沒(méi)有抑制作用。進(jìn)一步驗(yàn)證拮抗菌P-Y2-2和GJ1-8對(duì)半夏植株的生防效果,結(jié)果它們對(duì)半夏植株軟腐病的生防效果分別為66.67％和50.00％。
　　 拮抗譜研究表明,3個(gè)拮抗菌對(duì)23個(gè)細(xì)菌和真菌病原菌具有不同的拮抗效果,其中拮抗菌P-Y2-2和L1-5分別可抑制其中8個(gè)和9個(gè)病原菌的生長(zhǎng),拮抗菌GJ1-8僅能抑制4個(gè)病原菌的生長(zhǎng);對(duì)于7個(gè)非致病菌的拮抗作用表明,3個(gè)拮抗菌僅能抑制其中2

4、個(gè)非致病菌的生長(zhǎng)?？梢?jiàn)3個(gè)拮抗菌的拮抗譜均較窄,尤其是對(duì)細(xì)菌的拮抗譜較窄,表現(xiàn)對(duì)半夏軟腐病原菌具有一定的專(zhuān)性抑制作用。從微生物生態(tài)學(xué)的角度而言,一定的專(zhuān)性抑制作用不會(huì)對(duì)植株原有的微生物生態(tài)產(chǎn)生較大影響,這對(duì)于生防菌在生物防治中的實(shí)際應(yīng)用具有重要意義。
　　 應(yīng)用傳統(tǒng)方法和分子生物學(xué)方法對(duì)生防效果顯著的3個(gè)拮抗菌進(jìn)行了初步鑒定。形態(tài)學(xué)、生理生化及16Sr RNA和gyrB基因序列分析表明:拮抗菌P-Y2-2為泛菌屬菠蘿泛菌Pant