葡萄黑色芽變品種巴西(Brazil)果皮顏色突變的分子機制初探.pdf

1、本研究以白色品種意大利(Italia)、紅色品種紅高(Benitaka)和黑色品種巴西(Brazil)為試驗材料，檢測了VvmybA1的基因型以及VvmybA1和UFGT基因在不同著色時期的表達量，克隆了意大利、紅高和巴西中的VvmybA1完整的啟動子和編碼區(qū)序列，并進行功能驗證，以期探究黑色芽變品種巴西果皮顏色變化的原因。具體研究結(jié)果如下:
　　1.為了鑒定意大利、紅高和巴西之間的親緣關(guān)系，篩選了22對多態(tài)性較好的SSR引物進行

2、SSR分析。結(jié)果表明:22對SSR引物在三種葡萄中擴增出的等位基因條帶大小完全一致，表明意大利、紅高和巴西之間的親緣關(guān)系極為緊密，從而驗證了紅高和巴西均為意大利的芽變品種。
　　2.PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)在VvmybA1位點，意大利含有純和的VvmybA1a(1559bp)、紅高和巴西含有雜合的VvmybA1a扣VvmybA1BEN(926bp)。采用熒光定量技術(shù)分析VvmybA1和UFGT在三種材料中的相對表達情況，發(fā)現(xiàn)二者在白色品種意

3、大利中幾乎檢測不到，在有色品種中表達模式一致，即從著色后開始表達，并且在黑色品種中表達量高于紅色品種。
　　3.從三個品種中克隆了VvmybA1完整的啟動子和編碼區(qū)序列，用BioXM2.6同已知序列進行比對，并且利用Plant Care和Place在線分析軟件進行啟動子預測，發(fā)現(xiàn)在紅高和巴西的啟動子區(qū)域存在一個堿基的差異，且差異位點恰好在3-AFl binding site這個光響應原件中。將三種材料的VvmybA1啟動子和編碼區(qū)