白香蕉葡萄芽變突變體鑒定及四倍體誘導研究.pdf

1、白香蕉為歐美雜交種，為中晚熟品種，適應性強，抗寒、抗?jié)?，抗病力較強。從一次田間采取材料的過程中，我們從一個果農(nóng)的葡萄園中發(fā)現(xiàn)了白香蕉葡萄芽變突變體。芽變后的白香蕉果皮為紫紅色。由于白香蕉在豐產(chǎn)性、抗病、抗?jié)竦确矫姹仍S多其它歐美雜種葡萄(如巨峰、紅富士等)更加顯著，田間管理較其它品種粗放，生產(chǎn)投入更低，加之果皮的紅色芽變，商品性提高，因此白香蕉葡萄的紅色芽變有較高的推廣價值。本試驗擬以白香蕉的紅色芽變突變體(二倍體)為材料，與未芽變的白香

2、蕉材料進行形態(tài)學和分子生物學方面的比較鑒定，并采用化學藥物(秋水仙素)對田間多年生活體材料和綠枝扦插材料進行處理，擬進一步獲得少核的四倍體葡萄，并為最終獲得無核三倍體提供親本材料。本論文還研究了該芽變材料的離體快繁體系，對外植體的消毒、初代培養(yǎng)、叢生芽增殖、生根壯苗培養(yǎng)等組織培養(yǎng)的關鍵環(huán)節(jié)進行了培養(yǎng)基篩選。具體研究結果如下： (1)白香蕉與芽變突變體的形態(tài)學特征區(qū)別表現(xiàn)在幼葉顏色上，前者的幼葉顏色為銅銹色，后者為黃白色。說明果皮

3、芽變基因可能與控制幼葉顏色基因有關。 (2)物候期方面，芽變突變體比白香蕉提前13天成熟。紅色芽變能提早成熟可能與芽變突變體糖分積累加快，不溶性的原果膠轉變?yōu)榭扇苄缘墓z速度提高有關。這可以減少成熟期裂果和鳥害的危害。 (3)果實品質(zhì)方面，兩者可溶性糖的含量、糖酸比、果肉硬度、耐拉力均達到顯著差異。芽變突變體可溶性糖較原品種提高3.5﹪，糖酸比降低11.3，果肉硬度增加0.1kg/m2，耐拉力提高0.41kg。這表明突變

4、體能提高果實的商品性能。 (4)從100條ISSR引物中篩選出18條引物，用于白香蕉葡萄及其芽變的分析中。18條引物共擴增出104條帶紋。其中，引物823能區(qū)分出對照及其芽變株，結果表明ISSR標記能有效的應用于本材料的芽變鑒定。 (5)在快繁體系建立研究中，用70﹪的乙醇處理外植體20s，再用0.1﹪的升汞浸泡8min成活率達到68﹪。在不同滅菌方法對接種效率的研究中，以70﹪的乙醇處理10s，0.1﹪升汞消毒3min

5、，無菌水沖洗2次后，用CA/AA溶液浸泡3h，再以0.1﹪升汞消毒6min,無菌水沖洗4次的二次間歇滅菌的方法獲得外植體的無菌系最好。 (6)適合白香蕉芽變材料初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為MS+2mg/L6-BA+0.2mg/LNAA。出芽率達到83﹪。以MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA作為白香蕉芽變株系試管苗的增殖培養(yǎng)基為宜。增殖系數(shù)達到3.1。用MS+0.2mg/L6-BA+1.0mg/LIBA對叢生芽生長為幼莖

6、的配方為最佳。生長為幼莖的百分率達到75﹪。生根培養(yǎng)基為MS+0.5mg/LIBA，生根率達到為90﹪，根系質(zhì)量好，并有大量側根產(chǎn)生，無愈傷形成。 (7)從成活率和變異可能性機率較大兩方面考慮，用秋水仙素處理田間活體芽變材料，其濃度以0.2﹪左右，處理時間在48-72h之間為宜。 (8)在用秋水仙素處理多年生葡萄新梢和綠枝扦插葡萄新梢誘導多倍體時，通過對處理材料根尖和卷須的染色體數(shù)目計數(shù)，各檢測到一株加倍的四倍體材料，前