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文檔簡介
1、本研究選用杜長大保育豬為試驗材料,就不同氨基酸和免疫增強劑(黃芪多糖、益生菌)的互作對保育豬生長性能、免疫性能、豬瘟抗體水平、腸道黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)育的影響進行比較分析,并利用大腸桿菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)以模擬仔豬免疫應(yīng)激狀態(tài),旨在揭示保育豬在不同氨基酸和免疫增強劑的互作下的抗病力及抗應(yīng)激差異的免疫學(xué)機理,并確定氨基酸和免疫增強劑的最佳組合;為養(yǎng)豬從營養(yǎng)免疫角度來尋找更健康、更安全的飼養(yǎng)管理方法和抗生素替代
2、思路提供依據(jù)。本試驗研究分為三個部分。
第一部分:不同氨基酸與免疫增強劑對保育豬生長發(fā)育及抗應(yīng)激能力影響的研究。
選擇31±1日齡健康的保育豬675頭,將試豬隨機分為9個組,每個組3個重復(fù)(欄),每個重復(fù)25頭豬,公母比例接近。試驗采用2×4多因素完全隨機化試驗設(shè)計,分別是在基礎(chǔ)日糧中添加0.14%蘇氨酸(Thr)、0.15%蛋氨酸(Met)、0.86%精氨酸(Arg)、1.0%谷氨酰胺(Gln)與0.03%黃芪多糖
3、(APS)、0.15%益生素,兩兩相互組合,共8個試驗處理組,1個基礎(chǔ)日糧對照組。試驗期30天,分為飼養(yǎng)試驗(25d)和LPS免疫應(yīng)激試驗(5d)兩階段。試驗結(jié)果表明:
(1)生長性能:Thr、Met、Arg與APS、益生菌的互作對提高仔豬日增重?zé)o顯著作用(P>0.05);而Gln與APS、益生素的互作能顯著促進仔豬的生長性能(P<0.05);
(2)生化指標(biāo):各組合的互作對應(yīng)激前仔豬機體的尿素氮、總膽固醇和甘油三酯
4、等的含量無顯著影響(P>0.05),但 Gln+益生素、Arg+APS能顯著抑制應(yīng)激后尿素值的升高(P<0.05);
(3)血清酶活性:應(yīng)激前Met+益生素、Arg+APS能顯著促進r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)升高(P<0.05),Gln+APS極顯著提高谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AIL)(P<0.01),而LPS應(yīng)激后Gln+APS組的GGT、AIL均極顯著下降(P<0.01);
(4)抗氧化指標(biāo):應(yīng)激前,各組合均不同程度促進了血
5、清中丙二醛(MDA)的升高,Thr+APS組影響極顯著(P<0.01),Thr+益生素、Gln+益生素、Gln+APS、Met+APS、Arg+APS組影響顯著(P<0.05),而應(yīng)激后各組合極顯著抑制了MDA的升高(P<0.01),其中Met+APS組抑制效果最優(yōu)。
(5)體液免疫指標(biāo):各組合對總蛋白、白蛋白、球蛋白等指標(biāo)在應(yīng)激前后均無顯著影響(P>0.05),而精Arg+益生素、Gln+益生素、Gln+APS、Thr+AP
6、S等組極顯著地促進了免疫球蛋白g(IgG)的升高,同時又極顯著地抑制了應(yīng)激后IgG的下降(P<0.01);
(6)血液生理指標(biāo):應(yīng)激前后,各試驗組合對白細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)無顯著影響(P>0.05);
(7)生長激素和促生長因子:應(yīng)激前,各組合均極顯著地促進血液中生長激素(GH)、生長抑素(SS)的升高(P<0.01),以Gln+APS、Arg+益生素對GH的效果最好,而Gln+益生素對SS的
7、影響最大,而對胰島素樣生長因子1(IGF-1)無顯著影響(P>0.05);應(yīng)激后,各組合仍能顯著促進GH的上升(P<0.05),而以Met+APS、Met+益生素、Arg+益生素效果最好,而Gln+APS、Gln+益生素、Met+益生素組極顯著抑制了SS的上升,同時Thr+APS、Arg+APS、Met+APS組也極顯著促進了IGF-1的升高(P<0.01)。
(8)炎性細(xì)胞因子:應(yīng)激前,Gln或Arg+益生素均顯著促進血液中
8、γ-干擾素(γ-IFN)的升高,而Met+APS或益生素的組合又顯著抑制γ-IFN的升高(P<0.05),而各組合均能顯著降低血液中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)的含量,其中以Arg+APS或益生素、Gln+APS、Met+APS效果最好,而Thr+APS、Arg+APS或益生素等三組顯著促使仔豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)的升高;而應(yīng)激后,Met+APS或益生素組合均極顯著促進γ-IFN的升高(P<0.01),除Thr組外,其余組對IL
9、-1β的上升有顯著影響(P<0.05),而Thr、Arg等組均極顯著抑制豬腫瘤壞死因子α的上升(P<0.01)。
結(jié)果說明,各組合對豬生長性能無顯著促進作用,但Arg、Gln與APS、益生菌的互作對調(diào)節(jié)仔豬的免疫性能有顯著促進作用,同時APS在調(diào)節(jié)機體體液免疫、抗應(yīng)激方面要顯著優(yōu)于益生菌。
第二部分:不同氨基酸與免疫增強劑的互作對保育豬小腸形態(tài)學(xué)發(fā)育及盲腸內(nèi)微生物的影響。
試驗設(shè)計同第一部分。在試驗結(jié)束后,
10、每組每重復(fù)選1頭健康豬只屠宰,采集十二指腸、空腸和回腸腸段、腸粘膜以及盲腸糞便等樣本,用于腸形態(tài)學(xué)、黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、微生物數(shù)量等指標(biāo)的檢測。結(jié)果表明:(1)不同氨基酸與黃芪多糖、益生菌的互作對十二指腸腸絨毛長度、寬度及絨毛高度/隱窩深度有顯著影響(P<0.05),其中以Gln+APS、Gln或Arg+益生菌組對提高小腸絨毛長度、寬度及絨毛高度/隱窩深度比值方面作用效果最強;(2)各組合均能顯著促進腸道 SIgA的分泌
11、,其中 Gln或 Thr或 Arg+益生素、Gln+APS等四組具有極顯著地促進作用(P<0.01);(3)各組合均有抑制腸道大腸桿菌繁殖,促進乳酸桿菌繁殖的作用趨勢,其中Gln或Arg+益生素組效果顯著(P<0.05)。說明谷氨酰胺、精氨酸與益生菌的互作對腸黏膜免疫系統(tǒng)的發(fā)育及其功能的完善具有全面顯著的促進作用。
第三部分:不同氨基酸與免疫增強劑對保育豬豬瘟抗體水平及變化趨勢的影響研究。
設(shè)計同第一部分。根據(jù)豬場具
12、體免疫程序,28日齡時,各個組首免豬瘟疫苗,首免前3天及首免后第7d、15d、22d(即試驗豬25日齡、35日齡、42日齡、49日齡)時,前腔靜脈采血,分離血清,用于豬瘟抗體檢測。結(jié)果表明:豬瘟首免前和免后前2周各處理組與對照組比差異均不顯著(P>0.05)。而在免后第3周(即49日齡),各處理組與對照組的差異有進一步拉大的趨勢,其中對于免前陽性組(免疫前抗體呈陽性),各添加組仔豬抗體阻斷值下降的速率有所減緩,而對于免前陰性組,Gln+
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