Wolbachia對麗蚜小蜂生殖的影響.pdf

1、煙粉虱Bemisia tabaci Gennadius廣泛分布于世界各地，是世界范圍內(nèi)的重要經(jīng)濟(jì)害蟲。生物防治是治理煙粉虱的一種有效手段。其中恩蚜小蜂屬中的麗蚜小蜂Encarsiaformosa Gahan是煙粉虱若蟲期重要的寄生蜂，前人已在研究中發(fā)現(xiàn)麗蚜小蜂體內(nèi)存在有Wolbachia共生菌，并且麗蚜小蜂的產(chǎn)雌孤雌生殖也被認(rèn)為是由這種共生菌引起的。
　　 Wolbachia（沃爾巴克氏體）是一類隨母性遺傳的專性內(nèi)寄生菌，在節(jié)肢

2、動物中有著廣泛的分布。它可以對寄主的生殖產(chǎn)生調(diào)控作用，不僅會影響寄主的生殖方式，還會對寄主的生殖力產(chǎn)生影響。前人經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)用抗生素可以有效的除去寄主體內(nèi)的Wolbachia。
　　 本文選用不同濃度的鹽酸四環(huán)素（抗生素的一種）喂食麗蚜小蜂，并且喂食的時間不同，觀察不同處理后蜂的存活率和Wolbachia的清除效果。并在該實(shí)驗(yàn)結(jié)果上選用能有效除去麗蚜小蜂體內(nèi)Wolbachia的抗生素濃度和處理時間，觀察除去Wolbachia后蜂的

3、抱卵量和卵巢管數(shù)量的變化。最后比較了麗蚜小蜂和野外煙粉虱感染的Wolbachia的wsp基因序列。最終得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 (1)不同濃度抗生素處理時間不同對麗蚜小蜂Wolbachia的清除效果及存活的影響。不同的抗生素濃度和處理時間都會對蜂的存活率產(chǎn)生顯著影響。隨著抗生素濃度的增加和處理時間的延長，蜂的死亡率增加。當(dāng)用50 mg/mL的抗生素處理時，在12h、24 h、48 h三個處理時間段內(nèi)，蜂的死亡率均達(dá)到100％。這

4、說明高濃度的抗生素對麗蚜小蜂有一定的毒理作用，甚至?xí)鸫品涞乃劳?。若想有效的除去麗蚜小蜂體內(nèi)的Wolbachia又能獲得活蜂，則在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)將處理時間設(shè)定為24 h，抗生素濃度控制在5 mg/mL-10 mg/mL范圍內(nèi)。
　　 (2)不同濃度抗生素處理麗蚜小蜂對當(dāng)代及清除Wolbachia后的子代抱卵量和卵巢管數(shù)量的影響。通過喂食濃度分別為1、5、10 mg抗生素/mL蔗糖水，結(jié)合PCR檢測對麗蚜小蜂體內(nèi)Wolbachia的清

5、除效果，解剖觀察麗蚜小蜂F0代及子代(F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3)抱卵量和卵巢管數(shù)量，評價Wolbachia對麗蚜小蜂生殖的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):抗生素處理Wolbachia后的F0代蜂抱卵量與未處理蜂相比顯著下降，但顯著高于經(jīng)抗生素處理清除Wolbachia的F0代的子代(F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3)蜂抱卵量，子代(F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3)蜂之間無顯著差異;抗生素處理清除Wolbachia后F0代蜂的卵巢管數(shù)量與未處理蜂之間無顯著差異，但子代(F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3)蜂的

6、卵巢管均為6條，顯著少于F0代蜂的卵巢管數(shù)量;清除抗生素后，麗蚜小蜂可以產(chǎn)生雄性后代，但未見交配行為，且雌蜂可以不經(jīng)交配而產(chǎn)生雌性后代。結(jié)果表明，Wolbachia不僅直接影響麗蚜小蜂的抱卵量，而且還可以通過影響麗蚜小蜂卵巢管的發(fā)育影響麗蚜小蜂的抱卵量，清除Wolbachia不改變雌蜂的孤雌生殖方式。
　　 (3)測定并比對了麗蚜小蜂與煙粉虱體內(nèi)的Wolbachia的wsp序列。麗蚜小蜂和煙粉虱感染的Wolbachia均屬于B大