論文——動物胚胎移植技術研究與應用進展

1、<p>　　胚胎移植技術在奶牛生產(chǎn)中的應用</p><p>　　奶牛群體數(shù)量小、個體單產(chǎn)水平低是我國目前奶牛業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀。而迅速擴大群體，提高個體單產(chǎn)是解決這一矛盾的瓶頸。</p><p>　　實施奶牛胚胎移植技術既能充分發(fā)揮優(yōu)良奶牛在品種改良和育種中的作用，又提高了優(yōu)秀奶牛的繁殖能力、加快遺傳進展、克服奶牛不孕癥、降低引種費用、減少疾病傳播等方。利用高產(chǎn)奶牛繁殖，使優(yōu)質(zhì)后代增加

2、7－10倍，又能引進優(yōu)質(zhì)種畜，加快改良本地奶牛的步伐。</p><p>　　目前采用的主要方式是以凍配繁殖和外購奶牛為主，但凍配改良時間長、數(shù)量有限，外地購買，成本高、牛源緊張，特別是高產(chǎn)奶牛有價無市，很難購買，而且還受疫病等因素的影響，嚴重制約我國乳業(yè)的發(fā)展。要改變目前這一狀況，必須改良現(xiàn)有奶牛的遺傳性狀，以提高奶牛的泌乳單產(chǎn)，而胚胎移植正是解決這一系列問題的最好方式之一，它可利用現(xiàn)有的奶牛群體，經(jīng)移植優(yōu)質(zhì)奶牛

3、胚胎產(chǎn)奶犢牛，達到加速擴繁高質(zhì)量奶牛群的目的。</p><p>　　一、應用胚胎移植技術，建立優(yōu)質(zhì)奶牛高效繁殖平臺</p><p>　　隨著我國人民生活水平的不斷提高，乳品市場的快速增長帶動了奶牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展。由于奶牛是單胎動物，自然狀態(tài)下一頭母牛一年一胎，且雌雄性別比各占五成，終生也只能提供3~4頭有效后代（母牛）。使得國內(nèi)現(xiàn)有良種奶牛種群擴繁受到很大限制，從國外大批引進種奶牛要花大

4、量外匯，同時受到隔離場數(shù)量不足及進口國牛源、質(zhì)量的限制。因此，應用胚胎移植技術，采用XY性別控制及胚胎移植技術，產(chǎn)、學、研多方合作建立我市優(yōu)質(zhì)奶牛高效繁殖平臺，快速擴繁高產(chǎn)奶牛群是尤為重要的。</p><p><b>　　二、主要技術內(nèi)容</b></p><p>　　胚胎移植又稱借腹懷胎，專業(yè)來講是受精卵移植。即將體內(nèi)（優(yōu)秀奶牛）、外生產(chǎn)的早期胚胎發(fā)育至多細胞、桑椹胚

5、或胚泡階段的胚胎后，移植到同種的生理狀態(tài)相同的雌性牛生殖道內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為正常奶牛的生物技術。其主要內(nèi)容包括：供體和受體母牛的選擇，供體奶牛的超數(shù)排卵，供體與受體母牛的同期發(fā)情，胚胎的回收，胚胎質(zhì)量的鑒別，胚胎的冷凍保存，胚胎移植，　受體的妊娠診斷等。</p><p>　　優(yōu)良胚胎的獲得是胚胎移植技術的基礎和關鍵性。體內(nèi)胚胎的獲得是通過超數(shù)排卵技術，從優(yōu)秀的奶牛（供體）體內(nèi)采得胚胎；體外胚胎的獲得是通過胚胎工程

6、技術在供體奶牛體外獲得胚胎，主要有體外受精技術、胚胎的分割、胚胎的克隆等,是解決大量胚胎來源的一條重要、有效的途徑，是當前工廠化生產(chǎn)胚胎的主要手段。</p><p>　　胚胎移植的作用主要有以下幾方面：</p><p>　　１、充分發(fā)揮了優(yōu)良母牛的繁殖潛力，提高繁殖效率；按照目前的技術水平，供體奶牛每隔60d可進行超排處理一次，每次能獲得可用胚胎4-5枚，一頭良種母牛每年能生產(chǎn)可用胚胎25

7、-30枚，移植到受體內(nèi)能獲得12-15頭犢牛，而在自然狀態(tài)下，一頭母牛平均每年只能獲得一頭犢牛。</p><p>　?。?、簡化良種引進方法；胚胎收集后經(jīng)特殊處理，完全不攜帶病原微生物，可代替活畜的引進。胚胎移植與胚胎冷凍技術相結合后，良種的引進可簡化為冷凍胚胎的引進，使得胚胎可以長期保存，令胚胎移植突破了時間和空間的限制。大大節(jié)約購買和運輸種牛費用。而且產(chǎn)生后代對引種地生態(tài)環(huán)境適應性和抗病力增強。</p&g

8、t;<p>　?。?、降低種質(zhì)資源保護利用費用；結合胚胎冷凍技術為可保存國家或地區(qū)間特有的家畜品種資源，建立種質(zhì)資源庫提供新的技術手段，還可降低種質(zhì)資源保存費用。</p><p>　　４、加速育種進程；育種工作中，公畜所起的作用遠大于一頭優(yōu)良奶牛。奶牛產(chǎn)生后代少————產(chǎn)生成熟卵子數(shù)量有限；胚胎的發(fā)育是在母體內(nèi)進行，妊娠占去奶牛一生中大部分時間。 MOET技術能獲得更多具有高產(chǎn)性能的半同胞和全同胞，在

9、較短的時間內(nèi)達到后裔測定所要求后代的數(shù)量，提早完成后裔測定工作，增加選擇強度和準確性，縮短育種進程。 </p><p>　?。?、作為研究手段胚胎移植是研究受精作用、胚胎學和遺傳學等基礎理論問題的一種很好手段，另外，牛的體外授精、克隆牛等高新技術最終都要利用胚胎移植產(chǎn)出犢牛。</p><p>　　三、胚胎移植的技術程序受體的選擇</p><p>　?。薄⒐?、受體牛

10、選擇；</p><p>　　供體應是良種，而且為性狀表現(xiàn)優(yōu)秀、具有較高育種價值與遺傳優(yōu)勢的個體；生產(chǎn)性能高、遺傳性穩(wěn)定、系譜清楚體質(zhì)健壯、繁殖機能正常、無遺傳和傳染性疾病、年齡在15月齡到5周歲以內(nèi)的母牛作為供體。</p><p>　　受體奶牛一般選用價格低廉、生產(chǎn)性能比較低的同種奶牛，達到配種年齡和體型；體型與膘情中上等，初產(chǎn)或經(jīng)產(chǎn)青壯年奶牛。檢疫和疫苗接種與供體相同，身體健康，無生殖道

11、疾病和難產(chǎn)病史，繁殖狀況正常，有正常的發(fā)情周期，母性良好。　</p><p>　　2、供體奶牛的超數(shù)排卵；</p><p>　　在供體奶牛發(fā)情周期的適當時期，用促性腺激素進行處理，誘發(fā)其卵巢上有大量卵泡同時發(fā)育并排卵即為超排。其目的是讓優(yōu)良奶牛充分發(fā)揮其繁殖潛力。超數(shù)排卵的方法較多，但目前較多采用促卵泡素減量注射法進行處理，超數(shù)排卵處理的時期應選擇在發(fā)情周期的后期，即黃體消退時期?！　?l

12、t;/p><p><b>　　3、供體奶牛配種；</b></p><p>　　適當?shù)臅r間，優(yōu)質(zhì)精液對供體奶牛進行輸精。使用密度大、活率高的精液輸精次數(shù)2-3次，間隔8-10h。用XY性控精液對經(jīng)超數(shù)排卵處理的供體奶牛進行配種。</p><p>　　4、胚胎的采集（沖卵）回收； </p><p>　　非手術法是用兩通路或三通

13、路沖管通過直腸把握的非手術法進行沖卵并回收利用的過程。主要包括：器械和沖卵液的準備，供體奶牛的保定和麻醉，沖卵管的插入，灌流回收卵，術后處理等環(huán)節(jié)。</p><p>　　5、檢胚和分級； </p><p>　　回收到的沖洗液盛于玻璃器皿中，靜止１０～２０分鐘，待胚胎沉降到器皿底部，移去上層液后開始檢卵。</p><p>　　檢測透明帶的形態(tài)和完整性；胚胎的發(fā)育與胚

14、齡是否一致；胚胎的形態(tài)與勻稱性；細胞質(zhì)的結構及顏色；胚內(nèi)大小的變化是否出現(xiàn)空泡，細胞碎片，有無游離細胞。在顯微鏡下將胚胎檢出后進行洗滌，根據(jù)胚胎形態(tài)及發(fā)育階段將胚胎分為A、B、C級。</p><p><b>　　6、胚胎的移植；</b></p><p>　　目前移植采用非手術方式，如同人工受精一樣，把胚胎注入受體牛子宮腔內(nèi)。要注意細菌感染，防止出血。胚胎移植時期是子宮

15、的黃體時期，子宮頸關禁閉，與外界呈強的隔離狀態(tài)。無菌操作非常重要。移植器進入到與黃體同側的子宮角內(nèi)將胚胎推出。移植主要包括受體牛的準備，移植器械的準備，胚胎的解凍、移植。</p><p>　　7、胚胎的冷凍保存；</p><p>　　將胚胎在體內(nèi)、體外正常發(fā)育溫度下，暫時儲存起來而不使其失去活力；通常將其保存于低溫或超低溫情況下，使細胞代謝處于新陳代謝和分裂速度減慢或停止，即使其發(fā)育處于暫

16、時停頓狀態(tài)，一旦恢復正常溫度時，又能再繼續(xù)發(fā)育。</p><p>　　胚胎冷凍保存是胚胎移植產(chǎn)業(yè)化不可缺少的環(huán)節(jié)，也是動物保種，建立基因庫不可缺少的手段之－。它對動物繁殖學﹑胚胎生物技術等的基礎理論研究具有重要價值</p><p>　　胚胎冷凍保存適應胚胎移植產(chǎn)業(yè)化；便于運輸、建立基因庫。具體方法：異體活體保存（1-3d）。常溫保存，15-25℃（24h）。低溫保存0-5℃，目前認為5-1

17、0℃比較好。超低溫冷凍保存：常規(guī)冷凍保存和玻璃化冷凍保存。</p><p>　　世界奶業(yè)發(fā)展的歷程表明，奶牛保持良種是奶業(yè)發(fā)展的基本資源，奶牛品種的不斷改良提高是奶業(yè)發(fā)展的根本動力；研究、發(fā)展和實施奶牛群體遺傳改良技術體系和良種快速擴繁體系，是我國奶業(yè)進一步發(fā)展的基本途徑，胚胎移植技術如：胚胎冷凍、胚胎分割、體外授精、性別控制、轉基因、克隆等技術手段在這一進程中將發(fā)揮核心推動作用。</p><

18、p>　　目前的胚胎移植技術還存在很多問題。胚胎來源限制了胚胎移植的效率和實際應用；同時缺乏熟練操作的技術人員，胚胎冷凍保存仍存在很多問題；胚胎移植費用高，人力和時間耗費大；雖然這些條件嚴格制約了胚胎移植技術的推廣應用，但我國奶業(yè)發(fā)展將不斷應用牛胚胎移植技術，相信隨著養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，高產(chǎn)純種奶牛的緊缺，牛胚胎移植技術將在生產(chǎn)中的全面應用推廣。胚胎移植規(guī)模將不斷擴大，效率不斷提高，走向國內(nèi)外市場，并將在高產(chǎn)核心群的快速擴繁、優(yōu)秀種公牛的