山東小麥孢囊線蟲群體對(duì)環(huán)境響應(yīng)的表型特征及滯育機(jī)制.pdf

1、小麥孢囊線蟲病已在世界范圍內(nèi)造成嚴(yán)重的危害，是制約小麥和大麥生產(chǎn)的主要因素之一。各地區(qū)地理位置、氣候條件不同，小麥孢囊線蟲群體的孵化侵染特點(diǎn)也不同。為明確山東泰安小麥孢囊線蟲(cereal cyst nematode，CCN)群體對(duì)環(huán)境的響應(yīng)，2010年和2011年對(duì)自然、室內(nèi)條件下小麥孢囊線蟲群體的孵化特性，小麥孢囊線蟲群體對(duì)種植模式的響應(yīng)，不同小麥品種對(duì)小麥孢囊線蟲的抗病性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，并對(duì)小麥孢囊線蟲滯育卵與非滯育卵全蛋白進(jìn)行

2、差異比較。研究結(jié)果如下：
　　 1.小麥孢囊線蟲的孵化對(duì)人工和自然條件改變的響應(yīng)
　　 小麥孢囊線蟲孢囊卵和自由卵的孵化對(duì)溫度處理的響應(yīng)不同。孢囊卵的孵化最適溫度處理為4℃低溫-30d，然后轉(zhuǎn)入15℃中溫處理，其次是15℃恒溫處理，兩處理間差異不顯著。卵孵化最適條件為15℃恒溫，且顯著大于其他處理。其次為4℃低溫-30d轉(zhuǎn)入15℃中溫處理。4℃恒溫處理的孢囊卵和自由卵均無孵化高峰出現(xiàn)。
　　 小麥孢囊線蟲孵化與外

3、界環(huán)境溫度的變化相適應(yīng)。4月土壤中孢囊絕大多數(shù)為空孢囊，未進(jìn)行孵化試驗(yàn)，11月至次年3月，田間孢囊置于15℃下孵出的J2明顯高于其他月份。
　　 4月份開始有少量白色孢囊形成，8月份土壤中新孢囊數(shù)量達(dá)全年最高值。土壤中空孢囊與總的孢囊量的全年變化趨勢(shì)大體一致。6月土壤中新孢囊及空孢囊較多，出現(xiàn)峰值。隨著秋季氣溫的降低，土壤中J2開始漸漸增多，3月J2數(shù)量達(dá)到全年高峰值，顯著高于其他月份。總體來講，全年孢囊內(nèi)卵的數(shù)量要多于J2數(shù)。

4、4月、5月新孢囊內(nèi)無J2，夏季滯育期間，孢囊內(nèi)有J2，但不活動(dòng)。在小麥生長期間，10月至次年3月，孢囊內(nèi)的卵呈下降趨勢(shì)，J2數(shù)量變化不明顯。
　　 2.小麥品種(系)對(duì)Heterodera avenae群體的抗性鑒定
　　 供試20個(gè)小麥品種中無高抗(HR)和中抗(MR)品種，所有品種表現(xiàn)高度感病(HS)。在接種量相同的條件下，小麥根系的生長狀況與最終形成的孢囊量沒有明顯相關(guān)性。
　　 3.小麥孢囊線蟲群體對(duì)種植

5、模式的響應(yīng)
　　 本試驗(yàn)是種植模式循環(huán)體系中第一年，非寄主作物播前收后各種植模式間孢囊線蟲群體減少差異不顯著，兩季小麥播種前各處理小麥孢囊線蟲群體的變化差異不顯著。為明確種植模式對(duì)小麥孢囊線蟲群體數(shù)量的影響，正繼續(xù)試驗(yàn)。
　　 4.小麥孢囊線蟲滯育與非滯育卵全蛋白差異比較
　　 試驗(yàn)根據(jù)小麥孢囊線蟲的性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)條件，統(tǒng)一采用機(jī)械勻漿法破碎孢囊，選用7種全蛋白提取試劑提取小麥孢囊線蟲全蛋白，進(jìn)行電泳分析。通過比較電

6、泳譜帶及提取經(jīng)濟(jì)適用性，得出E(20％蔗糖，50mM Tris-HCl(pH7.1)，0.5％Triton X-100,0.1％SDS)為提取小麥孢囊線蟲全蛋白較優(yōu)的提取試劑。
　　 運(yùn)用提取試劑E提取線蟲全蛋白，進(jìn)行SDS-PAGE電泳，比較滯育、非滯育小麥孢囊線蟲全蛋白差異。滯育小麥孢囊線蟲蛋白總量最高，4℃低溫處理CCN蛋白含量最低。從蛋白譜帶數(shù)量上看，滯育孢囊蛋白電泳圖譜及4℃-40d處理均得到33條蛋白譜帶，經(jīng)升溫的滯

7、育解除處理得到的蛋白條帶數(shù)最多。與滯育線蟲蛋白相比，4℃-40d處理缺少分子量為200KD蛋白譜帶，多出12.69KD的小分子量蛋白譜帶；4℃-40d，轉(zhuǎn)入15℃-7d處理，多5條蛋白帶；在解除滯育的兩處理中，4℃-40d，轉(zhuǎn)15℃處理比4℃-40d處理多5條蛋白帶。
　　 尿素直接提取法提取小麥孢囊線蟲全蛋白，2-D電泳后，經(jīng)Image Master TM 2D Platinum 5.0軟件分析，兩組電泳圖譜共檢測(cè)到230個(gè)蛋