虎杖育種關(guān)鍵技術(shù)初步研究.pdf

1、中藥虎杖為蓼科植物Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc的干燥根和根莖。隨著虎杖藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的提高和各方面研究的不斷深入，與虎杖資源相關(guān)的各項(xiàng)研究已受到重視，本論文在以下方面進(jìn)行了研究。
　　在抗旱研究方面，由于虎杖適宜生長(zhǎng)在濕潤(rùn)的環(huán)境，如果提高虎杖的抗旱性，則有利于擴(kuò)大虎杖的栽培面積，而這方面的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，本論文以6個(gè)產(chǎn)地的虎杖為材料，研究了虎杖抗旱指標(biāo)的選擇與測(cè)定方法。選擇的形態(tài)學(xué)指標(biāo)包括:葉

2、面積比、葉夾角、葉柄長(zhǎng)度、花梗長(zhǎng)度、苞片長(zhǎng)度、花序長(zhǎng)度;生理學(xué)指標(biāo)包括:葉片相對(duì)含水量、過(guò)氧化物酶、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、脯氨酸、丙二醛。對(duì)這些指標(biāo)在不同產(chǎn)地的虎杖間的變化規(guī)律進(jìn)行了研究，以進(jìn)一步建立虎杖抗旱評(píng)價(jià)體系，推動(dòng)虎杖抗旱育種方面的研究。結(jié)果表明:
　　1.不同產(chǎn)地虎杖形態(tài)結(jié)構(gòu)特征相似，但是其葉形態(tài)指標(biāo)存在較大差異，葉面積、葉夾角和葉柄長(zhǎng)度三者與抗旱能力呈負(fù)相關(guān);各個(gè)產(chǎn)地虎杖花期指標(biāo)差異很小，對(duì)反應(yīng)抗旱能力大小很微弱

3、。上述虎杖的抗旱性從大到小依次為:藥植園虎杖＞都江堰虎杖＞巴中虎杖＞甘孜虎杖＞峨眉虎杖。
　　2.室內(nèi)模擬水分脅迫下，隨聚乙二醇-6000（PEG-6000）濃度的增大，葉片相對(duì)含水量(RWC)下降，水分飽和虧(WSD)上升，丙二醛(MDA)含量因品種的不同而略有差異，過(guò)氧化物氧化酶(SOD)及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)脯氨酸(Pro)含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，過(guò)氧化物酶(POD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。
　　3.運(yùn)用隸屬函數(shù)法

4、對(duì)不同品種虎杖的生理指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，其結(jié)果與形態(tài)指標(biāo)得出的結(jié)果一致，藥植園、都江堰虎杖為高抗品種，巴中和甘孜為中抗品種，峨眉虎杖抗旱性相對(duì)最低。
　　在遺傳多樣性研究方面，為了探索新的分子標(biāo)記技術(shù)在虎杖育種中的應(yīng)用，本論文建立了虎杖基于iPBS分子標(biāo)記的體系，并用iPBS技術(shù)對(duì)四川省內(nèi)6個(gè)地區(qū)的9份虎杖種質(zhì)資源進(jìn)行了遺傳多樣性研究。結(jié)果表明:
　　1.從50個(gè)iPBS引物中篩選出22個(gè)多態(tài)性較高的引物，對(duì)9個(gè)樣品進(jìn)行擴(kuò)增，

5、共得到161條擴(kuò)增片段，其中66.5％的片段具有多態(tài)性，平均每個(gè)引物可擴(kuò)增出4.86個(gè)多態(tài)性片段。UPGMA聚類結(jié)果表明，利用iPBS技術(shù)，當(dāng)遺傳相似遺傳系數(shù)0.79為閾值，根據(jù)親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近，可將供試材料分為5類。
　　2.多樣性分析結(jié)果表明，虎杖種質(zhì)資源在分子水平上存在較大差異，依據(jù)iPBS分子標(biāo)記劃分的虎杖基因型與地域性有密切關(guān)系，可為進(jìn)行虎杖種質(zhì)資源分類和育種提供參考。
　　以上這些研究，為虎杖育種方面的初步研究，有