葡萄三倍體新株系的獲得.pdf

1、本研究主要通過二倍體和四倍體雜交選育三倍體葡萄新品系。二倍體親本為2004-6-12、大瀨戶、巴拉多、美人指和亞歷山大（分別簡(jiǎn)稱為6、D、B、M、A），四倍體親本包括高魯碧、安蕓皇后和翠峰（分別簡(jiǎn)稱為G、Q、S），其中2004-6-12、大瀨戶、巴拉多為雄性不育（雌能花）單株，其他親本均為完全花品種。共有21個(gè)雜交組合。分別于人工雜交后37天、42天、47天、52天和57天采集未成熟果實(shí)，進(jìn)行胚挽救培養(yǎng)。幼胚萌發(fā)后，經(jīng)過擴(kuò)繁，對(duì)幼苗進(jìn)行

2、了溫室煉苗移栽。本研究對(duì)影響胚挽救的胚珠發(fā)育培養(yǎng)基、胚珠處理方式和不同倍性親本的雜交親和性等因素進(jìn)行了探討，對(duì)二倍體×四倍體葡萄獲得的雜種幼苗進(jìn)行了倍性鑒定。另外采集成熟種子沙藏后田間播種，獲得雜種苗，并且在四倍體自交后代中選育得到三倍體植株。取得的主要研究結(jié)果如下:
　　 1.獲得了一批三倍體葡萄單株利用二倍體和四倍體葡萄雜交培育三倍體葡萄新品系。采用胚挽救技術(shù)對(duì)雜交后的幼胚進(jìn)行培養(yǎng)，獲得了41個(gè)雜種單株，另外通過田間播種獲得

3、了12個(gè)雜種單株。綜合利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)、染色體觀察、形態(tài)學(xué)比較（氣孔觀察等）和分子標(biāo)記等技術(shù)，在幼苗期進(jìn)行倍性檢測(cè)和遺傳鑒定，確定6Q47-1，6Q52-1，6Q52-3，6S52-3，6S52-5，DG42-1, DG42-2, BQ52-5, AS52-1, MS52-2, MS47-1, MS47-2, MS47-3, MS57-2,BG-003，BG-005，MS-002，MS-003等18個(gè)單株為三倍體，其他雜種單株均為二倍

4、體。
　　 2.以二倍體和四倍體葡萄雜交獲得的未成熟合子胚為材料，成功誘導(dǎo)了體細(xì)胞胚發(fā)生。
　　 初生胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基為NN69+NAA1.80 mg·L-1+CH0.4 mg·L-1+AC2 g·L-1+蔗糖30g·L-1，52 DAP和47 DAP取樣培養(yǎng)時(shí)，初生胚誘導(dǎo)率分別達(dá)到11.11％和16.67％;次生胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基分別為3/4MS+IBA0.35mg·L-l+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1和MS+6-B

5、A1.5 g·L-1+IBA0.2 g·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1;體細(xì)胞胚在擴(kuò)繁培養(yǎng)基上再生植株。利用流式細(xì)胞儀和SSR標(biāo)記檢測(cè)源自同一未成熟合子胚（胚珠）的不同株系的遺傳穩(wěn)定性，結(jié)果顯示，所測(cè)植株均為三倍體，且都來(lái)自雜交所得的未成熟合子胚。
　　 3.從四倍體葡萄翠峰的自交后代中選育得到三倍體新品系5-11。
　　 采用形態(tài)學(xué)比較、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、染色體觀察和SSR標(biāo)記等技術(shù)對(duì)翠峰的實(shí)生后代株系