一個新的小麥白粉病抗性基因的發(fā)現(xiàn)與分子標記定位.pdf

1、由禾本科布氏白粉菌小麥?；?Blumeria graminis f.sp.tritici，Bgt)引起的小麥白粉病是一種嚴重的葉部病害。培育抗病品種較其它化學和栽培防治是一種最經(jīng)濟、環(huán)保而有效的方法。然而，由于小麥白粉菌生理小種多，毒性頻率變異快等特點，致使大部分抗病品種在生產(chǎn)上大規(guī)模推廣3-5年后便失去抗性。因此，發(fā)掘和鑒定新的抗白粉病基因在小麥育種道路上是一項堅持不懈的工作。
　　 從德國引進的小麥新種質(zhì)Tabasco是本

2、實驗室鑒定得到的一個抗白粉病優(yōu)異資源。它在南京地區(qū)高抗田間白粉病菌種。為此，本實驗室用我國第一個糯小麥品種寧糯麥1號(不含有效抗白粉病基因)與Tabasco雜交，構(gòu)建了F1、F2及F2:3家系，用于白粉病抗性遺傳分析和分子標記定位，以期發(fā)掘出一個新的抗白粉病基因并能有效的將其應用于育種和生產(chǎn)。
　　 對F1進行大田誘發(fā)鑒定顯示，寧糯麥1號和誘發(fā)行蘇麥3號于拔節(jié)前已高度感病，F(xiàn)1整個生育期則表現(xiàn)高抗。用Bgt19生理小種對472株

3、F2群體進行室內(nèi)苗期鑒定，結(jié)果顯示，抗感植株數(shù)目比為359:113，經(jīng)卡方測驗符合3:1的分離比例。結(jié)合F1和F2鑒定結(jié)果可推斷Tabasco中存在一個顯性的主效抗白粉病基因，我們暫時將其命名為PmTa。隨后用436個F2:3家系進行驗證，純抗、雜抗和純感的家系數(shù)分別為101、238和97，經(jīng)卡方測驗符合1:2:1的分離比例，從而進一步驗證了F2的基因型。借助分子標記手段，運用BSA法分別等量混合6株高抗單株DNA和6株高感單株DNA，

4、配成抗池和感池，結(jié)合抗感親本對挑取的覆蓋全基因組的244對標記進行多態(tài)性檢測，尋找在抗感親本和抗感池之間多態(tài)一致的標記，從而推測抗病基因所在染色體。結(jié)果顯示位于5DS的SSR標記Xgwm205在抗感親本和抗感池間表現(xiàn)一致的多態(tài)，群體檢測與目的基因連鎖，遺傳距離為17.6cM。隨后根據(jù)已發(fā)表的小麥遺傳圖譜，對5D染色體短臂及其著絲粒區(qū)域的標記(46對)進行多態(tài)性篩選與群體檢測，發(fā)現(xiàn)Xcfd81位于目的基因的另一側(cè)，遺傳距離為3.1 cM。

5、根據(jù)已定位在5DS的EST序列開發(fā)出了一個STS標記Xmp510，距離目的基因1.3cM。由于實驗中鑒定到的目的基因與已報道的Pm2位點相近，為此用15個Bgt生理小種對Tabasco與Ulka/8℃c(含Pm2)進行抗譜分析。結(jié)果顯示，Tabasco高抗所有生理小種，而Ulka/8℃c對其中四個生理小種高感，二者的抗譜不同，可以確定Tabasco的抗病基因不同于Pm2。此外，用Tabasco與Ulka/8℃c配置雜交組合并構(gòu)建了含20