溝葉結(jié)樓草抗逆突變體的誘變和篩選.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩67頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、溝葉結(jié)縷草(Zoysia matrella[L.]Merr.)又名馬尼拉,是一種優(yōu)良的暖季型草坪草,廣泛應(yīng)用于我國南方大部分地區(qū)。溝葉結(jié)縷草在自然界中通過匍匐莖無性繁殖,無法用雜交育種等傳統(tǒng)方法對其進(jìn)行遺傳改良,因此,體細(xì)胞無性系變異等生物技術(shù)在溝葉結(jié)縷草育種、抗逆性和觀賞性狀改良中有著重要作用。
   本試驗以繼代了5年的溝葉結(jié)縷草匍匐莖誘導(dǎo)的胚性愈傷組織為材料,比較了不同培養(yǎng)溫度(4℃和25℃)對愈傷組織胚性保存和再生的影響

2、,不同輻射劑量(0、5、10、20、40、80、100、150、200、250、300 Gy)的60Coγ射線對愈傷組織生長再生的影響。同時,對愈傷組織進(jìn)行了氯化鈉(NaCl)和草甘膦(Glyphsoate)篩選,獲得了少量抗性植株,并對這些植株的田間抗性進(jìn)行了檢測,對抗鹽植株在NaCl脅迫下的抗氧化酶活性和脯氨酸含量變化進(jìn)行了研究。
   主要研究結(jié)果如下:
   1.經(jīng)過4℃培養(yǎng)后,愈傷組織再生速度減慢,因此6周后愈

3、傷組織再生率顯著低于25℃培養(yǎng)的愈傷組織。不同培養(yǎng)時間后,再生的外植體比率波動較大。前11個月中,具有再生能力的愈傷組織比率保持在91.7%-97.9%之間,與25℃條件下持平。只有當(dāng)愈傷組織在4℃條件下培養(yǎng)了13個月后,具有再生能力的愈傷組織比率才顯著下降至58.3%。當(dāng)愈傷組織在4℃培養(yǎng)19個月后,所有愈傷組織都失去了再生能力。
   2.當(dāng)輻射劑量為20 Gy時,愈傷組織的具有再生能力的愈傷組織比率和再生率達(dá)到最高,分別為

4、97.71%和27.08%。當(dāng)輻射劑量為100 Gy時,10.42%的愈傷組織再生成了小苗。當(dāng)輻射劑量≥150 Gy時,具有再生能力的愈傷組織比率和再生率都顯著下降。
   3.根系健全植株(NR)和去根植株(NN)在含0.3 M NaCl的再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)6周后,株高和根長都顯著低于普通再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)6周的根系健全植株(CR)和去根植株(CN),表明NaCl顯著抑制了試管苗葉片和根系的生長。CR和CN的植株存活率并不存在顯著

5、性差異,表明剪除根系對植株存活沒有顯著影響。CR和CN的存活率顯著高于NR和NN,而NR的存活率又顯著高于NN,表明0.3 M NaCl對植株的存活有顯著影響,但是根系可以有效的減小NaCl對植株的傷害。NR和NN葉片的長寬比顯著低于CR和CN,說明葉片在NaCl脅迫下變得粗短。
   4.通過兩輪愈傷組織NaCl篩選,有大約60%的愈傷組織存活下來。但是,僅0-100 Gy的每個輻射梯度有少數(shù)愈傷組織在含2.5 M NaCl的

6、再生培養(yǎng)基上再生成了小苗。對0、5、10、20、40 Gy輻射組的再生植株,Ze1、Fv1、Te1、Tw1和Fr1進(jìn)行了抗鹽性測定,以未經(jīng)過輻射處理和NaCl篩選的再生植株作為對照組(CK組)。在鹽處理的第5天,CK組的葉片首先出現(xiàn)了枯黃的現(xiàn)象。鹽處理結(jié)束后的第7天,Ze1、Fv1、Te1和Fr1組僅15,24,16和8%的葉片出現(xiàn)枯黃,而CK組56%的葉片都出現(xiàn)了枯黃。Ze1、Fv1、Te1和Fr1組的DGCI值(30.88、31.1

7、7、30.45和37.70)顯著高于CK組(27.39%),Tw1組(25.82%)則和CK組不存在顯著性差異。
   5.正常生長條件下,不同植株的脯氨酸含量之間均不存在顯著性差異,NaCl處理組和對照組的脯氨酸含量之比在0.94-1.09之間。鹽處理后,CK、Ze1、Fv1、Te1和Fr1的NaCl處理組和對照組脯氨酸含量之比分別升高至5.95、3.12、2.78、1.84和3.45。Ze1對照組的SOD活性顯著高于植株的對

8、照組,其NaCl處理組的POD和CAT活性與對照組相比顯著升高。Fr1的NaCl處理組的CAT活性與其對照組相比顯著升高,并顯著高于其他植株的NaCl處理組。
   6.在兩輪草甘膦篩選中,分別有43.5%和60%的愈傷組織存活了下來,并轉(zhuǎn)移到了不含草甘膦的再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)。8周后,將成功再生的小苗轉(zhuǎn)移到添加了0.05 M草甘膦的再生培養(yǎng)基上。4周后,葉尖開始焦黃枯萎。8周后,抗草甘膦植株中,10%的葉片仍保持綠色,而對照組中,

9、所有的葉片都枯黃或枯萎干癟。在實驗中我們還發(fā)現(xiàn),有新的小苗從枯死的植株周圍再生,部分莖節(jié)長出了根系,并伸長到培養(yǎng)基中。
   7.噴施草甘膦2周后,對照組中,70%的葉片都發(fā)生了枯黃的現(xiàn)象,20%的葉片枯萎死亡,并且大都集中在草坪的下層。在抗草甘膦植株中,30%的葉片發(fā)生了枯黃現(xiàn)象,并且大都集中在植株11、12和13。噴施草甘膦4周后,對照組中,90%的葉片都枯萎死亡,但抗草甘膦植株中,枯黃的葉片量并沒有繼續(xù)增長,并且,植株31

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論