EMS誘變甘蔗突變體庫的構(gòu)建及其SSR引物的篩選.pdf

1、本研究以湖南漢壽地方甘蔗品種為誘變試驗材料，構(gòu)建其組織培養(yǎng)體系，研究不同濃度的EMS溶液處理愈傷組織、組培芽和田間莖芽的誘變效果，確定誘變最適劑量。為了準(zhǔn)確篩選得到突變植株，利用95份甘蔗材料對SSR引物進(jìn)行多態(tài)性篩選，最終利用獲得的SSR核心引物對誘變材料進(jìn)行鑒定，篩選獲得突變體，同時結(jié)合田間農(nóng)藝性狀對突變體進(jìn)行評價。研究結(jié)果如下:
　　1甘蔗組織培養(yǎng)體系的構(gòu)建中，不同濃度2，4-D對愈傷組織的誘導(dǎo)率高低順序為30mg/L＞3.

2、5mg/L＞4.0mg/L＞25mg/L＞2.0mg/L，最大分化率為93.92％;愈傷組織分化培養(yǎng)基中添加6-BA與NAA時，甘蔗愈傷組織平均分化率在70.00％到95.00％之間，當(dāng)添加NAA和KT時，平均分化率則低于70.00％，添加6-BA比添加KT分化效果更顯著;無菌芽增殖的培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA、NAA、KT激素組合，在一定的范圍內(nèi)濃度越高，增殖系數(shù)越大，但是到達(dá)一定值后反而會隨之降低。
　　2EMS誘變甘蔗愈

3、傷組織、組培芽以及田間莖芽時，處理相同時間的情況下，隨著EMS溶液濃度的增加，生長勢均呈現(xiàn)下降的趨勢;同樣當(dāng)EMS誘變濃度相同時，隨著處理時間的增加，生長勢也呈現(xiàn)下降的趨勢。
　　3從已公布的68對SSR引物中，篩選獲得21對多態(tài)性較高的核心引物，其中PIC值最大的是0.9279，最小值為0.7855，平均值為0.8664。本研究采用19個群體共95份材料對21對核心引物的多態(tài)性進(jìn)行驗證，結(jié)果表明UPGMA聚類圖可將19個群體劃分

4、為4個亞群，同時群體結(jié)構(gòu)分析將其劃分為6個亞群，95份驗證材料在21對引物中表現(xiàn)出豐富的多樣性。即21對SSR引物能夠很好的區(qū)分本研究的各個材料，可用于突變材料的檢測。
　　4利用21對引物對經(jīng)EMS誘變的愈傷組織和組培芽成活的共320株植株進(jìn)行多態(tài)性擴增，均未檢測出遺傳變異植株。而對經(jīng)EMS溶液處理的田間莖芽篩選出的共1000株植株進(jìn)行多態(tài)性擴增，共檢測出31株突變株。
　　5對突變株及對照植株的七項田間農(nóng)藝性狀進(jìn)行調(diào)查，