三倍體枇杷實(shí)生后代及雜交后代SCoT標(biāo)記及DNA甲基化分析.pdf

1、三倍體植物營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)旺盛,具有明顯的雜種優(yōu)勢(shì)。由于三倍體細(xì)胞體積的增大所引起的巨大性以及由于減數(shù)分裂紊亂而造成的育性降低,從而使三倍體成為獲得無(wú)籽果實(shí)和獲取材積為目標(biāo)的果樹與林木育種的主要目標(biāo),三倍體雜交或自交是獲得非整倍體材料的有效途徑。本試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)起始密碼子多態(tài)性分子標(biāo)記(Startcondon targeted polymorphism,SCoT)和甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性(Methylationsensitive amplified p

2、olymorphism,MSAP)技術(shù),對(duì)天然三倍體枇杷優(yōu)系‘H324’及其實(shí)生后代、大五星(2X)與天然三倍體枇杷優(yōu)系‘G320’的雜交后代的DAN甲基化水平與模式的差異以及遺傳多樣性進(jìn)行分析。為三倍體枇杷的遺傳育種工作提供理論依據(jù)。試驗(yàn)主要結(jié)果如下:
　　 利用SCoT標(biāo)記及形態(tài)學(xué)性狀對(duì)天然三倍體枇杷優(yōu)系‘H324’實(shí)生后代進(jìn)行遺傳多樣性分析。形態(tài)學(xué)性狀的平均變異系數(shù)為32.63％(16.20％～44.80％),多樣性指數(shù)平

3、均為1.92(1.47～2.24),根據(jù)形態(tài)學(xué)性狀將12株實(shí)生后代分為3類。8條SCoT引物共擴(kuò)增出71條擴(kuò)增帶,其中有42條呈多態(tài)性,多態(tài)性帶比率為59.2％。12株實(shí)生后代遺傳相似系數(shù)在0.84～0.97之間,在相似性系數(shù)0.902處,13份供試材料(含母本)可分成7類。6對(duì)MSAP引物組合對(duì)‘H324’及其實(shí)生后代共擴(kuò)增出5227條帶,其中甲基化位點(diǎn)766個(gè),全甲基化位點(diǎn)544個(gè),半甲基化位點(diǎn)222個(gè),總甲基化率為14.7％?？偧?/p>

4、基化率在7.4％-19.9％,全甲基化水平在3.7％-13％,半甲基化率在1.7％-7.9％。
　　 對(duì)9份大五星(2X)與天然三倍體枇杷優(yōu)系‘G320’的雜交后代的6個(gè)主要形態(tài)性狀進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并分析,結(jié)果顯示,三倍體枇杷雜交后代主要性狀有明顯差異,表現(xiàn)出顯著的形態(tài)多樣性各性狀變異系數(shù)平均為31.94％(17.81％～40.48％),多樣性指數(shù)在平均為1.91(1.64～2.18),根據(jù)形態(tài)學(xué)性狀將9株雜交后代分為2類,8條SCoT

5、引物共產(chǎn)生68條擴(kuò)增帶,平均每條引物產(chǎn)生7～14條擴(kuò)增帶,其中有49條呈多態(tài)性,平均每條引物擴(kuò)增出6.13條多態(tài)性帶,多態(tài)性帶比率為72.1％。根據(jù)SCoT標(biāo)記數(shù)據(jù)11株枇杷(含親本)相似性系數(shù)在0.74～0.95之間,在相似性系數(shù)0.85處可將供試材料分成了4個(gè)類群。4對(duì)MSAP引物組合對(duì)雜交后代及其親本共擴(kuò)增出2027條帶,其中甲基化位點(diǎn)344個(gè),全甲基化位點(diǎn)265個(gè),半甲基化位點(diǎn)79個(gè),總甲基化率為14.7％。雜交后代的總甲基化水