蘋果砧木實生后代耐鹽性鑒定的分子標記篩選及相關基因片段分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、河北農業(yè)大學碩士學位論文蘋果砧木實生后代耐鹽性鑒定的分子標記篩選及相關基因片段分析姓名：孫葉紅申請學位級別：碩士專業(yè)：果樹學指導教師：徐繼忠；邵建柱20090610ScreenofMolecularMarkersoftheSalttoleranceAnalysisofRelatedGeneFragmentsinAppleRootstockSeedlingProgeniesCidate:SunyehongMaj:PomologySuPer

2、viser:XuJizhong(Profess)ShaoJianzhu(AssistantProfess)AbstractInthisstudythedifferencematerialthatistheseedlingprogeniesoftwohybridcombinationsinapplerootstockwereidentificationanalysisofdifferentiallyexpressedgenerelated

3、saltresistantusedSRAPSSRanalysisusedinabulkedsegregationanalysis(BSA)Themainresultswereasfollows:1.ThegenomicDNAofapplewasextractedbyamodifiedCTABmethod.Themodifiedisolationbuffer(100mmolLTrisHCl20mmolLEDTA1.4molLNaCl2%C

4、TAB)wasaddedtoantiphenolicantioxidantssuchas1%PVP4010mmolLNa2S2O51%βMercaptoethanaltopolysacidescanberemovedftheaddinganappropriateamounthighsalt.TheRNAwaseliminatedfromthesolutionwithRNasetheDNAwaspurifiedbychlofmisoamy

5、labsoluteethanol.2.TheoptimalSRAPsysteminapplerootstockwasestablished.Inatotalvolumeof15μLSRAPsystemitcontains60ngtemplateDNA10PCRBuffer(withMg2)1.5μLdNTP0.3mmolL150ngPrimer0.75UTaqDNApolymerase.3.TheoptimalSSRsysteminap

6、plerootstockwasestablished.Inatotalvolumeof15μLSRAPsystemitcontains60ngtemplateDNA10PCRBuffer(withMg2)1.5μLdNTP0.25mmolL10.33μmolL1primer1.0UTaqDNApolymerase.4.Therewere4pairsofprimers((Me1Em2Me1Em8Me1Em12Me1Em14)whichex

7、pressedpolymphisminparentsDNApooltotallyproduced4polymphicbsin128onesofSRAP.Inlowsalttolerancehighsalttolerancegroupsthefourmarkers(Me1Em2Me1Em8Me1Em12Me1Em14)alsoexpressedpolymphism.Theresultsofidentificationof144hybrid

8、swithMe1Em2Me1Em8Me1Em12Me1Em14suggestedthatexchangetookplacein15181611plantsrespectivelyof96lowsalttoleranceonesin4850plantsof48highsalttoleranceonesrespectively.Theresultsaboveindicatedthemarkersedcouldbeusedinidentifi

9、cationofsalttolerancefapplerootstock.5.Therewere3pairsofprimers(P61P63P64)whichexpressedpolymphisminparentsDNApooltotallyproduced10polymphicbsin79onesofSSR.Inlowsalttolerancehighsalttolerancegroupsthethreemarkers(P61P63P

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