向日葵銹病菌的種內(nèi)群體分化及SCAR標(biāo)記.pdf

1、本研究對(duì)中國(guó)北方向日葵主產(chǎn)區(qū)的向日葵銹菌進(jìn)行了生理小種鑒定研究，對(duì)2010年7～9月份在黑龍江、內(nèi)蒙古東部、中部、西部、河北、陜西、寧夏、新疆等地采集有典型銹病癥狀的病葉，收集病葉上的菌樣夏孢子，經(jīng)接種人工寄主黑大片，進(jìn)行單孢子堆分離擴(kuò)繁獲得44個(gè)純化菌系。利用三聯(lián)密碼系統(tǒng)命名法，將諸菌系接種于9個(gè)鑒別寄主：S37、CM90、CM29、P-386、HAR1、HAR2、HAR3、HAR4、HAR5，經(jīng)15~20天后反應(yīng)型穩(wěn)定，記載反應(yīng)型級(jí)

2、別，確定了6個(gè)生理小種：300、310、500、724、735、737；出現(xiàn)頻率分別為59％、16%、14%、7%、2%、2%，結(jié)果顯示300號(hào)小種為主要優(yōu)勢(shì)小種；將優(yōu)勢(shì)小種300接種于選取自各主要產(chǎn)區(qū)的44個(gè)代表性向日葵品種，得到感病品種12個(gè)，抗病品種31個(gè)，其中油葵品種中感病的占15%左右，食葵品種中感病的占39%，雜交種品種中感病的占31.6%，常規(guī)品種中感病的占80%。
　　運(yùn)用RAPD技術(shù)對(duì)44份菌樣進(jìn)行遺傳多樣性檢測(cè)

3、，從100條隨機(jī)引物中篩選出13個(gè)多態(tài)性高、穩(wěn)定性好的引物，對(duì)每個(gè)樣品的基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增，共獲得115個(gè)RAPD位點(diǎn)，其中多態(tài)位點(diǎn)91個(gè)，多態(tài)率為79.1%，RAPD產(chǎn)物分子量約在200bp~1700bp之間，用NTSYS-pc軟件中的UPGMA方法計(jì)算遺傳相似系數(shù)并作聚類(lèi)圖分析，結(jié)果顯示菌樣間遺傳相似系數(shù)在0.63~1.00之間，平均值為0.815，表明菌樣間具有豐富的遺傳多樣性；數(shù)據(jù)顯示在0.74遺傳相似系數(shù)下，供試菌樣可分為3