環(huán)境誘導的不同滯育性家蠶胚胎的基因芯片分析.pdf

1、家蠶是典型的卵滯育昆蟲。二化性家蠶次代卵的滯育性受親代卵在胚胎發(fā)育的中后期所體驗的環(huán)境條件調控，即親代卵高溫(25℃)光照，次代卵則滯育化；而低溫(15℃)黑暗則非滯育化。環(huán)境條件調節(jié)家蠶滯育的現(xiàn)象很早就受到研究者的關注，早期的內(nèi)分泌生理研究表明，家蠶滯育發(fā)生過程包括親代卵在胚胎期由感覺細胞接收環(huán)境的信息(如溫度、光照)，經(jīng)過感覺神經(jīng)傳遞到中樞神經(jīng)系統(tǒng)，被“特定”的細胞記憶，通過幼蟲期、蛹期長時程的保持，在蛹后期由腦控制食道下體分泌滯育

2、激素進入體液，通過調整體內(nèi)的代謝環(huán)境決定次代卵的滯育性。因此，環(huán)境調控家蠶卵滯育，包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)對環(huán)境條件的接收、記憶、保持、調節(jié)滯育激素合成和分泌以及由滯育激素調整體內(nèi)代謝等一連串過程。
　　 基因芯片是將大量探針分子固定于支持物上后與標記的樣品分子進行雜交，通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息，是高通量的分子生物學研究工具。由于用該技術可以將極其大量的探針同時固定于支持物上，所以一次可以對大量

3、的生物分子進行檢測分析，從而解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交技術復雜、自動化程度低、檢測目的分子數(shù)量少、低通量等不足。而且，通過設計不同的探針陣列、使用特定的分析方法可使該技術具有多種不同的應用價值，如基因表達譜測定、突變檢測、多態(tài)性分析、基因組文庫作圖及雜交測序等，為“后基因組計劃”時期基因功能的研究及現(xiàn)代醫(yī)學科學及醫(yī)學診斷學的發(fā)展提供了強有力的工具。
　　 本研究利用果蠅的基因芯片對環(huán)境誘導家蠶二化性品種的滯育性和非滯育性胚胎的基因表

4、達進行了研究，篩選標準為滯育組和非滯育組信號差異大于1.6，信號值大于1000。結果表明上調基因有31個，下調基因有29個。在上調基因中，有7個為EST(未知基因)片段，有24個為已知基因。下調基因中有5個為EST(未知基因)片段，24個為已知基因。因此共有48個已知功能的差異基因。通過對這些差異基因功能的分析，我們選擇與環(huán)境(光線、溫度)導致滯育有關的fne、mbt、trpl、par-l和toll五個基因，用實時定量PCR的方法進行了