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文檔簡介
1、AFLP(Amplified fragment length polymorphism)是一種新型的分子標記技術,目前已廣泛應用于生物遺傳多樣性研究、種質資源鑒定及動植物育種等領域的研究。本試驗建立了適合扁蓿豆的AFLP分析體系,并首次使用AFLP分子標記對扁蓿豆(Medicago ruthenica L.)種質的遺傳完整性進行檢測。以期為扁蓿豆種質資源保存、扁蓿豆分子遺傳圖譜的構建提供理論依據。主要研究結果如下:
1.建立了
2、適合扁蓿豆的AFLP分析體系。具體內容為:模板DNA的用量范圍為100ng-600ng;酶切體系中,EcoRⅠ和MseⅠ各加入3U,在37℃下酶切反應4h;加入接頭后在16℃連接10-12h;預擴增體系總體積為20μl,酶切連接產物為4μl;將預擴增體系稀釋20倍后用于選擇性擴增。
2.從64個EcoRⅠ和MseⅠ引物組合中篩選出8對條帶清晰,多態(tài)性高的引物,8對引物共擴增出92個位點,其中多態(tài)性位點41個,占總位點數(shù)的44.
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