日本鰻鱺腐皮病的原發(fā)病原及其治療試驗(yàn).pdf

1、日本鰻鱺(Anguilla japonica)是我國(guó)鰻鱺養(yǎng)殖業(yè)的重要種類之一。近年來(lái),養(yǎng)殖生產(chǎn)中流行一種新疾病--腐皮病,主要癥狀為病鰻體表黏液斑塊狀脫落;隨病情發(fā)展,病灶逐步擴(kuò)大,病灶主要出現(xiàn)于頭部和軀干部,進(jìn)而病灶處皮膚和肌肉潰爛:鰭條充血發(fā)紅,軀干部皮膚褪色、糜爛,病鰻體力、活力下降,導(dǎo)致死亡。目前,對(duì)其病原、病理等未見研究報(bào)道,也無(wú)良好的控制技術(shù)。本研究開展了致病菌病原分離、純化及保存研究;病原分類及其生長(zhǎng)條件的研究;組織病理學(xué)

2、研究;病原致病性的研究;敏感藥物的篩選研究;防治技術(shù)研究。主要結(jié)果如下:
　　 (一)從患病鰻鱺的病灶處分離獲得1株真菌菌株Js80122;通過(guò)孢子懸液背部肌肉注射、培養(yǎng)物創(chuàng)傷浸泡、孢子創(chuàng)傷涂抹、孢子與細(xì)菌混合注射等方法人工感染健康鰻鱺,證實(shí)了JsS0122為日本鰻鱺腐皮病的病原菌。于不同培養(yǎng)溫度條件下,以載玻片培養(yǎng)觀察法和蓋玻片插片培養(yǎng)觀察法對(duì)Js80122進(jìn)行生活史觀察與形態(tài)學(xué)鑒定,結(jié)果顯示Js80122為絲狀真菌,菌絲無(wú)橫

3、隔,分枝發(fā)達(dá),具無(wú)性與有性兩種生殖方式,動(dòng)孢子囊呈棍棒形或紡錘形,新生孢子囊以層出或聚傘狀方式生長(zhǎng),孢子具兩游現(xiàn)象,藏卵器中有1個(gè)以上的卵孢子,卵孢子光滑無(wú)皺縮。依據(jù)其形態(tài)學(xué)特征,鑒定Js80122為水霉科(Saprolegniaceae)、原綿霉屬(Protoachlya Coker)、原綿霉(Proroachlya paradoxa)。
　　 (二)取10μL孢子懸液滴加至滅菌麥粒水中,在試管中用檸檬酸、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉

4、、硼酸、氯化鈉分別調(diào)節(jié)麥粒水pH值和鹽度,根據(jù)菌絲在培養(yǎng)環(huán)境下的生長(zhǎng)狀況,研究日本鰻鲴腐皮病病原原綿霉Js80122的生長(zhǎng)、適宜生長(zhǎng)和最適生長(zhǎng)溫度、鹽度和pH值。試驗(yàn)證實(shí)Js80122在6℃-41℃范圍內(nèi)能生長(zhǎng),適宜生長(zhǎng)溫度為15℃-30℃,最適生長(zhǎng)溫度為25℃;在0.0-8.5％鹽度范圍內(nèi)能生長(zhǎng),適宜生長(zhǎng)鹽度為0.0-2.5％,最適生長(zhǎng)鹽度為0.00-0.34％;在pH值2.0-8.2范圍內(nèi)能生長(zhǎng),適宜生長(zhǎng)pH值為6.0-7.6,最適

5、生長(zhǎng)pH值為6.8。二因子正交試驗(yàn)顯示,最適生長(zhǎng)pH值和鹽度分別為7.0和0.0。
　　 (三)取體表潰瘍處皮膚、鰓及內(nèi)臟器官解剖進(jìn)行組織病理切片,鏡檢研究日本鰻鱺腐皮病組織病理學(xué)。病魚體表黏液脫落,皮膚潰爛,有出血和炎性滲出物、爛鰓,鰓絲固有結(jié)構(gòu)崩解,皮膚壞死。顯微鏡觀察病理切片:肌纖維融解、消失;心肌纖維紊亂、壞死,肌間白細(xì)胞浸潤(rùn),.血栓;肝臟腫大、壞死;脾出血,淋巴細(xì)胞數(shù)量減少;腸道粘膜上皮脫落、壞死,固有膜炎性白細(xì)胞浸潤(rùn)

6、;腎臟受損嚴(yán)重,廣泛充血、出血,白細(xì)胞浸潤(rùn),腎小管腫脹、壞死,腎小球萎縮,囊腔內(nèi)出血。
　　 (四)應(yīng)用管外對(duì)倍稀釋法測(cè)定12種抗真菌藥物對(duì)日本鰻鱺腐皮病致病菌原綿霉Js80122的最低抑菌濃度(MIC),結(jié)果顯示霉菌凈、水霉特效靈、康伸對(duì)菌株JsS0122較敏感。以人工感染菌株Js80122日本鰻鱺為模型,在水溫181±0.5℃條件下,開展腐皮病的治療技術(shù)研究,結(jié)果顯示霉菌凈、霉菌凈加二硫氰基甲烷控制真菌9 d和14 d能完全