甘藍(lán)型油菜中表達(dá)AtGA2ox8的表型分析及其對木質(zhì)素生物合成的影響.pdf

1、在高等植物體內(nèi),赤霉素(Gibberellin,Gas)是一類重要的植物生長激素,調(diào)節(jié)高等植物生長發(fā)育的各個方面。最明顯的作用包括促進(jìn)莖的伸長和種子萌發(fā),下胚軸伸長、果實(shí)發(fā)育,誘導(dǎo)開花,子葉開張以及刺激細(xì)胞生長和分化等。而在赤霉素生物合成和代謝途徑中,赤霉素氧化酶(GA2-oxidases)能夠?qū)⒂猩锘钚缘腉as或其前體代謝為無生物活性的GA。因此GA2過氧化酶(GA2ox)對植物生長和發(fā)育起著十分重要的作用。
　　 為了研究

2、外源赤霉素氧化酶基因?qū)Ω仕{(lán)型油菜的作用及影響,本論文將克隆的擬南芥赤霉素氧化酶基因(AtGA2ox8)構(gòu)建在pEGAD表達(dá)載體上,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花序浸染法將載有除草劑Basta篩選標(biāo)記的35S::GFP-AtGA2ox8質(zhì)粒導(dǎo)入甘藍(lán)型油菜N529中。經(jīng)Basta(1:800V/V)篩選、PCR、綠色熒光蛋白檢測、RT-PCR分析獲得轉(zhuǎn)基因植株。觀察并比較不同時期的植株表型,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因油菜有生長發(fā)育遲緩、萌發(fā)推遲、葉片濃綠、開花延遲、植

3、株矮化等特征。干濕物質(zhì)質(zhì)量差異表明AtGA2ox8抑制生物質(zhì)積累,較野生型降低16％-21％。80％丙酮-分光光度法測定葉綠素含量差異,結(jié)果顯示油菜中表達(dá)AtGA2ox8增加葉綠素總含量,但不影響葉綠素組成。葉綠素a、葉綠素b和總?cè)~綠素含量分別增加10.5％、9.5％和20％?；ㄇ嗨睾繙y定結(jié)果表明:AtGA2ox8促進(jìn)花青素的積累,花青素含量較WT增加2倍。溴乙酰-紫外分光光度法測定始花期油菜主莖的木質(zhì)素含量,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株木質(zhì)素含量