應用胚胎工程技術快速擴繁天祝白牦牛的試驗研究.pdf

1、為了加速天祝白牦牛的繁育進程，進行品種的培育和改良，本試驗緊密結合動物繁殖生產實踐，利用胚胎工程技術對54頭天祝白牦牛（供體）的超數排卵、86頭黑牦牛（受體）的同期發(fā)情以及胚胎回收、胚胎移植和超數排卵及同期發(fā)情前后供體和受體體內幾種重要生殖激素水平的變化等進行了研究和應用，從而探索出簡潔而高效的白牦牛胚胎移植技術體系，為白牦牛的快速繁殖提供理論依據，并形成規(guī)?；a。結果顯示：
　　 1、在利用等量法注射國產FSH進行超數排卵的

2、10頭牛中，有4頭牛反應良好，其中有2頭干巴，1頭牙日瑪和1頭頭麻，超排的有效率為40％。在超排結束后，這4頭牛的卵巢平均大小為（3.8±0.8）×（3.0±1.1）×（2.1±0.6）cm3，卵巢平均增幅為22.47±5.62倍。其中干巴牛的兩側卵巢上共有10個突出于卵巢表面的黃體，另外1頭牙日瑪和1頭頭麻的兩側卵巢上分別有2個和4個黃體。其余6頭牛的卵巢上有的雖然有卵泡生長發(fā)育，但是沒有成熟和排卵，卵巢上也沒有黃體形成，卵巢的體積有

3、不同程度的增大，卵巢平均增幅為5.73±4.21倍。
　　 2、在利用減量注射法的對比實驗中，共處理了10頭供體牛，有5頭牛的卵巢上有卵泡發(fā)育成熟，并且排卵。其中反應較好的是2頭干巴，另外2頭牙日瑪和1頭頭麻均在一側的卵巢上各有1個黃體，超數排卵的總有效率為50％。2頭干巴牛的卵巢大小平均為（3.6±1.1）×（2.5±1.0）×（1.8±0.8）cm3，增幅為24.15±2.36倍；另外3頭牛的卵巢體積平均為（2.5±1.0）

4、×（1.6±1.1）×（1.1±0.6）cm3，平均增幅為15.49±5.23倍。通過直腸檢查發(fā)現這5頭牛共有17個黃體突出于兩側的卵巢表面。反應效果不明顯的5頭牛的卵巢上有少量卵泡生長，但是沒有發(fā)育成熟，與處理前相比，它們的卵巢體積也明顯增大，平均大小為（1.8±0.8）×（1.4±0.6）×（1.0±0.6）cm3，增幅為3.16±2.80倍。
　　 3、在等量法注射進口FSH的實驗中共處理10頭供體白牦牛，有5頭牛超排效果

5、明顯，其中有2頭干巴，2頭牙日瑪和1頭頭麻，超排的有效率為50％。干巴牛的兩側卵巢上共有9個突出于卵巢表面的黃體，另外2頭牙日瑪兩側卵巢上共有4個黃體，1頭頭麻的兩側卵巢上有3個黃體。在試驗的10頭牛中，平均每頭干巴形成黃體3個，每頭牙日瑪形成黃體1個，每頭頭麻形成黃體1個。干巴的處理效果明顯高于牙日瑪和頭麻（P<0.05）。
　　 4、在減量法注射進口FSH的實驗組中，共處理了12頭供體牛，有6頭牛的卵巢上有卵泡發(fā)育成熟，并且

6、排卵，超排的有效率為50％。其中反應較好的有3頭干巴、2頭牙日瑪和1頭頭麻。這6頭牛共有22個黃體突出于兩側的卵巢表面。另外在處理的12頭牛中，干巴牛卵巢上有4個卵泡，牙日瑪有2個卵泡，頭麻有3個卵泡。
　　 5、應用CIDR和大劑量FSH處理供體白牦牛的實驗中，共處理了6頭供體白牦牛，其中有3頭牛超排反應良好，其余3頭牛反應不明顯，超排有效率為50％。反應良好的3頭牛兩側的卵巢上共有10個黃體，平均每頭?？色@得黃體數為1.67

7、個，并且有4個沒有排卵的卵泡。
　　 6、在應用PMSG處理的6頭供體牛中，有2頭牛在96h內出現發(fā)情癥狀，其卵巢上共有6個黃體，平均每頭牛的黃體數為1枚，另外有8個沒有排卵的卵泡存在，超排的有效率為33％。
　　 7、應用CIDR和FSH重復處理供體白牦牛的結果顯示，在處理的6頭牛中，有4頭牛反應良好，其余2頭牛反應不明顯，超排有效率為67％。直腸檢查可觸摸到反應良好的4頭牛兩側的卵巢上共有22個黃體突出于表面，平均每

8、頭?？色@得黃體數為3.67個，另有沒有排卵的卵泡5個。卵巢平均增幅為23.24±5.11倍。
　　 8、在應用CIDR+前列腺素法進行同期發(fā)情處理受體黑牦牛的實驗中，應用上海產PG處理的26頭牛中，有14頭牛出現了發(fā)情癥狀，其中在24h內發(fā)情的2頭，25h～48h內發(fā)情的有7頭，49h～72h內發(fā)情的3頭，73h以上發(fā)情的2頭，同期發(fā)情處理的有效率為53.8％，另有12頭牛未出現明顯的發(fā)情癥狀，但有2頭牛的卵巢上觸摸到了發(fā)育中的

9、卵泡；應用寧波產PG共處理了20頭受體牛，撤栓后24h內出現發(fā)情的有1頭，25h～48h內發(fā)情的有6頭，49h～72h內發(fā)情的3頭，73h以上發(fā)情的1頭，同期發(fā)情的有效率為55％，另有9頭牛在120h內未見發(fā)情癥狀。應用CIDR+氯前列烯醇法進行受體牛同期發(fā)情處理的總有效率為54.3％，受體牛的發(fā)情現象主要集中在撤栓后的25～72h之內，占發(fā)情總數的76％，24h以內發(fā)情的和73h以后發(fā)情的各占12％。
　　 9、使用前列腺素法

10、共計處理40頭受體牛，分為兩組，第一組共18頭牛，為一次注射氯前列烯醇組，在處理后的24h內出現發(fā)情的有0頭，25h～48h內發(fā)情的有0頭，49h～72h內發(fā)情的2頭，73h以上發(fā)情的2頭，總發(fā)情率為22.2％：第二組的22頭牛在第一次注射氯前列烯醇后，有2頭牛在25～72h內出現了發(fā)情現象，在對剩余的20頭進行第二次注射氯前列烯醇后，24h內出現發(fā)情的有1頭，25h～48h內發(fā)情的有3頭，49h～72h內發(fā)情的4頭，73h以上發(fā)情的1

11、頭，發(fā)情主要集中在注射激素后的25～72h以內，同期發(fā)情處理的總有效率為50％。
　　 10、本試驗用于沖胚的供體白牦牛共29頭，共沖出胚胎128枚，能夠用于移植的形態(tài)正常的胚胎104枚，另外24枚為等外胚胎。胚胎有效率為81.3％。在104枚正常胚胎中，有85枚桑葚胚，另外19枚為早期囊胚。其中40枚進行常溫保存，用于鮮胚移植，另外64枚進行冷凍保存，用于凍胚移植。
　　 11、在胚胎移植過程中，共鮮胚移植了27頭經同

12、期發(fā)情處理后的受體牛，移植2個月后通過直腸檢查診斷有14頭牛懷孕，妊娠率為52％。由于1頭懷孕牛意外死亡，產犢率為48.1％。將13枚冷凍胚胎分別移植給了13頭經同期發(fā)情處理過的受體黑牦牛，移植2個月后通過直腸檢查診斷有5頭牛懷孕并產犢，妊娠率為38.5％。同時在對自然發(fā)情黑牦牛的胚胎移植中，用新鮮胚胎移植的5頭牛中，有3頭牛懷孕，妊娠率為60％，另外6頭冷凍胚胎移植的牛中有3頭也發(fā)生懷孕，妊娠率為50％。
　　 12、在供體牛

13、超數排卵周期中，母畜血清孕酮的濃度在d8前沒有明顯的變化，保持相對穩(wěn)定的水平，但在d8后迅速下降，d10降到最低值，以后又開始升高。血清雌二醇的變化趨勢剛好相反。
　　 13、受體牛在同期發(fā)情處理周期中，血清孕酮和雌二醇的濃度變化與供體牛的變化趨勢相似，d10時孕酮的含量降低而雌二醇的含量升高。
　　 結果：表明，國產FSH與進口FSH在處理供體白牦牛進行超數排卵時，其效果差異不顯著；在同等條件下，使用大劑量的FSH對供

14、體白牦牛進行超數排卵，其效果與使用正常劑量FSH的處理效果之間沒有明顯的差異，其總有效率和平均每頭牛形成的黃體數幾乎相等；與使用CIDR+FSH進行超數排卵相比，使用PMSG處理供體白牦牛進行超數排卵的效果明顯要低；重復進行超數排卵處理的效果顯著地高于一次處理的效果，平均每頭牛的排卵數也明顯地高于一次處理組；采用CIDR+氯前列烯醇進行同期發(fā)情處理的總有效率要明顯地高于單純一次使用氯前列烯醇，但與重復兩次使用氯前列烯醇的同期發(fā)情效果差異