應激影響肉仔雞脂肪沉積的分子生物學機制.pdf

1、本研究利用外源糖皮質(zhì)激素(地賽米松，DEX)導入的方法建立肉仔雞的應激模型，從肉仔雞的生長前期和后期兩個階段探討應激對肉仔雞脂肪代謝的影響。通過研究應激對肉仔雞脂肪沉積規(guī)律影響的基礎上，重點考察了應激對肝臟脂肪從頭合成的影響機制。 應激對肉仔雞生長前期脂肪代謝的影響選取7日齡體重相近的Arbor Acres雄性肉雞108只，隨機分為三個處理：應激組(DEX)、對照組(Control)和采食量配對組(Pair-fed)。應激組每天

2、早8：00腹部皮下注射地塞米松(1mg/ml)，劑量為2.0mg/Kg體重，自由采食和飲水；對照組注射與應激組相同體積的生理鹽水，自由采食和飲水；采食量配對組注射與應激組相同體積的生理鹽水，同時飼喂應激組前一天的采食量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，應激顯著降低了14日齡肉仔雞的平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，增加了頸脂、腹脂、腿脂以及肝臟的脂肪沉積；應激顯著增加了血漿中胰島素水平，VLDL(極低級密度脂蛋白)也有增加的趨勢，這表明血液中脂類的流量增加；應激還提高

3、肝FAS(脂肪酸合成酶)以及ME(蘋果酸酶)的活性，促進肝臟ACC(乙酰輔酶A羧化酶)、FAS以及ME mRNA的表達。但頸脂和腹脂中LPL(脂蛋白脂酶)、PPARγ(過氧化物酶體增殖物激活受體)以及ATGL(脂肪細胞甘油三酯酶)mRNA的水平?jīng)]有受到應激的影響。這表明，應激導致脂肪沉積增加的主要原因是肝臟脂肪酸從頭合成的增強以及血漿中脂類流量的增加。 應激對肉仔雞生長后期脂肪代謝的影響選取35日齡體重相近的Arbor Acre

4、s雄性肉仔雞196只，隨機分為三個處理：應激組(DEX，劑量為2.0mg/Kg體重)、對照組(Control)和采食量配對組(Pair-fed)，自由采食、飲水。注射3d后，于38日齡分別隨機選取8只雞于飼喂和空腹狀態(tài)下采集血液、腹脂、皮下脂肪(腿部、頸部皮下)和肝臟樣品。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，DEE處理極顯著增加肝臟和頸脂的相對重量，DEX處理有增加腹脂和腿脂相對重量的趨勢；在禁食狀態(tài)下，DEX處理顯著增加血漿中TG(甘油三酯)、VLDL、尿酸和

5、胰島素的含量，使肝素后血漿中LPL活性升高；在飼喂狀態(tài)下，DEE處理顯著增加血糖、TG、VLDL、尿酸和胰島素含量：DEX處理顯著增加38日齡肉仔雞在禁食狀態(tài)下ME的活性，肝臟FAS的活性也有增加的趨勢，但DEX對飼喂狀態(tài)下肝臟FAS和ME的活性沒有影響。DEX處理極顯著地增加38日齡肝臟禁食狀態(tài)下ACC和FAS的mRNA水平，與配對組相比，DKX處理也有增加ME的mRNA表達量的趨勢，在飼喂狀態(tài)下，與配對組相比，DEX處理顯著增加肝臟

6、ACC和ME mRNA的水平；與配對組相比，DEX處理促進禁食狀態(tài)下腹脂F(xiàn)AS的mRNA水平，但對禁食狀態(tài)下腹脂ME的mRNA水平以及飼喂狀態(tài)下FAS、ME的mRNA水平都沒有顯著影響：DEX處理顯著增加飼喂狀態(tài)下腹脂LPL mRNA的水平，在禁食狀態(tài)下，LPL mRNA也有增加的趨勢，而腹脂ATGL和PPARγ不論是禁食還是飼喂狀態(tài)都沒有受到DEX處理的影響。這表明，肝臟脂肪酸從頭合成能力增加以及血漿中脂肪流量增多是38日齡應激肉仔雞

7、脂肪沉積增加的主要原因，這與應激對肉仔雞生長前期的影響也是一致的：血漿LPL活性增加以及腹脂LPL mRNA表達量的上調(diào)是應激肉仔雞脂肪沉積增加的另一個原因，這一點與應激對肉仔雞生長前期的影響不同，這可能與生長后期腹脂明顯增多有關系。 DEX和胰島素對離體培養(yǎng)的肉仔雞肝細胞脂肪酸合成的影響分離并培養(yǎng)6日齡肉仔雞肝細胞，培養(yǎng)15h后開始正式試驗，分為4個處理，每個處理6個重復。對照組：基礎培養(yǎng)液，為含5％新生牛血清的Willia

8、ms’E培養(yǎng)基；DEX組：基礎培養(yǎng)液中含DEX200nmol/L；INS組：基礎培養(yǎng)液中含胰島素100nmol/L；DEX+INS組：在基礎培養(yǎng)液中含DEX200nmol/L、胰島素100nmol/L。在CO2培養(yǎng)箱中37℃靜置培養(yǎng)24h。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，DEX和胰島素共同作用于肝細胞時，能顯著增加其FAS、ME以及ACC mRNA的表達量，而DEX或胰島素單獨處理沒有改變FAS、ME以及ACC mRNA的表達量。DEX或胰島素單獨處理沒有改

9、變?nèi)庾须u肝細胞LXRa和SREBP-1c mRNA的水平，但DEX和胰島素共同作用于肝細胞時，LXR(P=0.0036)的mRNA的水平顯著增加了，對于SREBP-1c mRNlA的水平，兩種激素共同作用與對照組或DEX組相比有增加的趨勢(P=0.0719)，而與胰島素處理相比沒有顯著差別。這表明，是DEX和胰島素的協(xié)同作用促進了肝臟脂肪酸的從頭合成，這與活體試驗即DEX處理以及由此導致的高胰島素血癥促進了肝臟脂肪酸合成的結(jié)果是一致的。