桑樹葉色突變體Cty-Sm的色素生理與分子生物學(xué)研究.pdf

1、葉色突變體是研究光合系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能及其調(diào)控機(jī)制的理想材料，在培育新品種方面也有很高的應(yīng)用價(jià)值，桑樹葉色突變體 Cty-Sm是稀有的種質(zhì)資源，研究其生理生化特性及突變機(jī)理具有理論與實(shí)踐意義。 本研究對(duì)桑樹葉色突變體(Cty-Sm)的遺傳規(guī)律與生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究，結(jié)果表明，在自然生長(zhǎng)條件下，突變桑Cty-Sm的斑葉突變性狀能保持穩(wěn)定遺傳。在離體培養(yǎng)條件下，突變桑葉片除表現(xiàn)原有斑狀葉色外，還表現(xiàn)為斑狀差異、黃化及復(fù)綠等多種形式，

2、并且其黃化程度隨光照條件的不同而變化。 在自然生長(zhǎng)及離體條件下，與正常生長(zhǎng)的對(duì)照桑相比，突變桑葉片黃化部分的葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量減少，其中葉綠素a的減少最為顯著，僅為正常桑的5.4％-10.2％，這是導(dǎo)致突變體桑Cty-Sm 葉色黃化的直接原因。 為探討葉綠素合成減少的生理原因，測(cè)定了葉綠素生物合成前體物質(zhì)的相對(duì)含量，與對(duì)照桑相比，結(jié)果表明桑葉色突變體Cty-Sm的δ-氨基酮戊酸(ALA)的相對(duì)含量明顯增加

3、，而膽色素原(PBG)的相對(duì)降低，表明葉綠素合成受阻的部位發(fā)生在ALA與PBG之間。 為探討突變體桑葉色變異的分子機(jī)理，對(duì)突變桑與正常桑的基因組DNA進(jìn)行了分析。首先，對(duì)影響擴(kuò)增結(jié)果的DNA模板濃度、變性時(shí)間、退火溫度和時(shí)間、延伸時(shí)間等主要因子進(jìn)行優(yōu)化，建立了較為穩(wěn)定的RAPD技術(shù)體系。在此基礎(chǔ)上，對(duì)突變桑與正常桑的基因組DNA進(jìn)行RAPD分析，結(jié)果在不同供試材料中都能擴(kuò)增出豐富的條帶，并從隨機(jī)引物S65、$85等的RAPD結(jié)果