雞胸腺發(fā)育形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、胸腺(thymus)為中樞淋巴器官，它是T細(xì)胞發(fā)育、分化和成熟的場(chǎng)所。骨髓中產(chǎn)生的T祖細(xì)胞在多種趨化因子的作用下進(jìn)入胸腺，在胸腺微環(huán)境內(nèi)發(fā)育分化為成熟的T細(xì)胞，進(jìn)入外周血和淋巴器官中，成為機(jī)體健康的衛(wèi)士。但動(dòng)物胸腺存在增齡性萎縮(退化)，功能減退現(xiàn)象，機(jī)體也隨之衰老，疾病叢生。本課題通過(guò)研究不同日齡雞胸腺形態(tài)結(jié)構(gòu)變化、神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)因子分布變化規(guī)律來(lái)探討胸腺發(fā)育和萎縮的機(jī)理，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　 1雞胸腺組

2、織學(xué)結(jié)構(gòu)的增齡性變化規(guī)律
　　 為研究不同日齡雞胸腺結(jié)構(gòu)增齡性特點(diǎn)，了解雞胸腺萎縮的可能機(jī)制，本課題采用HE和PAS染色技術(shù)對(duì)不同日齡雞胸腺切片進(jìn)行染色，并測(cè)定其形態(tài)學(xué)指標(biāo)。結(jié)果顯示，胸腺表層的被膜伸入到實(shí)質(zhì)內(nèi)，將其分成許多不完整的胸腺小葉。實(shí)質(zhì)由皮質(zhì)和髓質(zhì)構(gòu)成，表層皮質(zhì)著色較深，內(nèi)側(cè)髓質(zhì)染色較淺。皮質(zhì)主要由淋巴細(xì)胞和少量上皮細(xì)胞構(gòu)成，髓質(zhì)主要由上皮細(xì)胞和少量淋巴細(xì)胞構(gòu)成，內(nèi)含典型的胸腺小體結(jié)構(gòu)。隨著日齡增加，皮質(zhì)變薄，皮、髓質(zhì)

3、面積比例逐漸減??；髓質(zhì)部血管豐度逐漸遞增；典型胸腺小體能夠分泌多糖的活性，且總數(shù)有緩慢遞增趨勢(shì)，21日齡達(dá)峰值，35日齡后緩慢遞減；其中鈣化小體不具有分泌多糖的活性，隨增齡其數(shù)量有顯著遞增。這一研究表明，隨著胸腺的發(fā)育和衰老，骨髓中的始祖T細(xì)胞遷移至胸腺的能力以及分化的能力均下降，同時(shí)伴有胸腺細(xì)胞數(shù)量及其生活動(dòng)區(qū)域減少，即皮質(zhì)區(qū)域進(jìn)行性縮小，胸腺萎縮；由于衰老引起的T淋巴細(xì)胞減少不能滿(mǎn)足機(jī)體的需求，從而可能導(dǎo)致血管代償性的增多，也有可能

4、是中雞胸腺產(chǎn)生了大量死亡胸腺細(xì)胞胸腺血管要靠自身數(shù)量的增多才足以運(yùn)輸和清理增齡過(guò)程產(chǎn)生的大量死亡細(xì)胞，或者，胸腺萎縮使得單位范圍內(nèi)毛細(xì)血管豐度增加；具有多糖分泌活性的胸腺小體功能下降，可能從另一個(gè)側(cè)面為胸腺小體與胸腺的衰老有關(guān)提供了證據(jù)。
　　 2神經(jīng)遞質(zhì)5-HT在雞胸腺內(nèi)的增齡性變化規(guī)律
　　 為研究相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)(5-HT)在雞胸腺內(nèi)的分布及表達(dá)變化規(guī)律，本課題采用免疫組織化學(xué)SABC法對(duì)不同日齡階段的AA肉雞胸腺進(jìn)行

5、5-HT陽(yáng)性細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果顯示，各日齡雞胸腺都含有5-HT陽(yáng)性物質(zhì)，主要分布于胸腺髓質(zhì)以及皮、髓質(zhì)交界區(qū)。5-HT陽(yáng)性細(xì)胞大多圍繞血管壁或靠近血管呈簇分布，也有少量陽(yáng)性細(xì)胞的散在分布。陽(yáng)性細(xì)胞具有形態(tài)多樣性，大多呈圓形或卵圓形，還存在一些明顯的絲狀或束狀形態(tài)。另外，典型胸腺小體呈5-HT陽(yáng)性反應(yīng)，而在鈣化胸腺小體中5-HT則緊緊圍繞其外周分布。5-HT陽(yáng)性產(chǎn)物在雞胸腺中的表達(dá)強(qiáng)度隨日齡增長(zhǎng)有遞增趨勢(shì)。這一研究表明，5-HT陽(yáng)性細(xì)胞

6、在雞胸腺髓質(zhì)內(nèi)的優(yōu)勢(shì)分布提示5-HT可能參與胸腺T細(xì)胞的分化成熟，調(diào)節(jié)胸腺供血量；隨日齡增長(zhǎng)，5-HT表達(dá)強(qiáng)度呈遞增趨勢(shì)，而胸腺的發(fā)育在此過(guò)程中經(jīng)歷了增長(zhǎng)和萎縮，提示胸腺的發(fā)育情況與5-HT的表達(dá)強(qiáng)弱有關(guān)，低表達(dá)能促進(jìn)胸腺生長(zhǎng)，而高表達(dá)則抑制胸腺生長(zhǎng)并最終導(dǎo)致胸腺萎縮，即5-HT對(duì)胸腺的發(fā)育有免疫促進(jìn)和抑制雙重作用。
　　 3TLR4在雞胸腺內(nèi)的增齡性變化規(guī)律
　　 為研究相關(guān)免疫因子TLR4在不同日齡階段雞胸腺內(nèi)的分布

7、及表達(dá)變化，探討免疫因子對(duì)胸腺影響的可能性機(jī)制，本課題采用免疫組織化學(xué)SABC法對(duì)不同日齡階段的AA肉雞胸腺進(jìn)行TLR4陽(yáng)性細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果顯示，TLR4的陽(yáng)性表達(dá)產(chǎn)物見(jiàn)于雞胸腺發(fā)育的早期階段，且陽(yáng)性較強(qiáng)，120日齡雞胸腺中表達(dá)非常微弱。TLR4陽(yáng)性產(chǎn)物主要分布于胸腺皮質(zhì)、髓質(zhì)交界區(qū)，靠近髓質(zhì)的一側(cè)，形成一個(gè)典型的環(huán)狀。在髓質(zhì)中，這些陽(yáng)性細(xì)胞在胸腺小體和血管近附近呈簇分布，也有少量陽(yáng)性細(xì)胞的散在分布。TLR4陽(yáng)性細(xì)胞具有形態(tài)多樣性。