石油烴降解菌降解性能、機(jī)理與應(yīng)用研究.pdf

1、本文圍繞Brevibacillus panacihumi W25和Gordonia alkanivorans W33兩株高效石油烴降解菌，開展了兩菌石油降解性能、機(jī)理及其在鉆井巖屑處置中的應(yīng)用研究，取得的主要結(jié)果為：
　　采用W25和W33以及兩株菌混合降解1％的原油，經(jīng)過9天的降解，W25的降解率達(dá)到83.10%，W33的降解率達(dá)到91.73%，W25與W33的混合菌的降解率為96.42%，且W25和W33都有較廣的降解譜和長鏈

2、烷烴降解能力，應(yīng)用潛力較大。以多環(huán)芳烴菲為唯一底物時(shí)發(fā)現(xiàn)，W25不具有明顯的多環(huán)芳烴降解能力，W33在12天內(nèi)對多環(huán)芳烴的降解率為16.85%；兩株菌混合后12天內(nèi)對多環(huán)芳烴的降解率達(dá)到20.13%，顯示兩菌混合具有協(xié)同降解效應(yīng)。W25、W33以及混合菌降解含菲的原油試驗(yàn)中，多環(huán)芳烴菲的降解率有很大的提升，達(dá)到了87.65%；多環(huán)芳烴的加入對烷烴的降解影響不大?？傊訵25和W33兩菌初步構(gòu)建的混菌降解體系的降解效果好于單菌體系，證明

3、了兩菌的協(xié)同作用，說明所構(gòu)建的混菌降解體系具有較好的應(yīng)用潛力。
　　對W33進(jìn)行了全基因組測序分析，并對W25和W33的石油降解基因進(jìn)行了較為全面的分析。通過對W25所注釋的基因進(jìn)行分析，確定了7個(gè)參與石油烴降解的基因；通過對W33進(jìn)行注釋基因分析，確定了9個(gè)石油烴降解基因，并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Q-PCR）方法對這9個(gè)基因進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)合W25和W33的降解特點(diǎn)，從分子水平上初步分析了兩株菌降解石油中的直鏈烷烴、支鏈烷烴、多

4、環(huán)芳烴的機(jī)理。
　　為提高W25和W33實(shí)際應(yīng)用能力，以獲得最大生物量為目的，進(jìn)行了搖瓶、5L發(fā)酵罐、20L發(fā)酵罐的擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵條件優(yōu)化，找到了提高兩株菌發(fā)酵效率的最佳發(fā)酵條件，提升了發(fā)酵效率。
　　為驗(yàn)證初步構(gòu)建的W25和W33混菌降解體系在實(shí)際應(yīng)用中的效果，以鉆井巖屑為研究對象，通過實(shí)驗(yàn)室正交實(shí)驗(yàn)，考察了菌、肥料以及表面活性劑對堆肥結(jié)果的影響。結(jié)果顯示，菌水平影響最大，其次是肥料。以實(shí)驗(yàn)室結(jié)果為指導(dǎo)，開展了中試規(guī)模的鉆井