細(xì)菌菌群降解石油的影響因素及應(yīng)用研究.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，各國(guó)對(duì)石油的需求量日益增大，與此同時(shí)對(duì)生念環(huán)境也造成了極大的危害。生物修復(fù)技術(shù)，特別是微生物修復(fù)日益成為科學(xué)家研究的重點(diǎn)。本研究的主要目的是富集馴化獲得石油降解細(xì)菌菌群，進(jìn)而研究其修復(fù)性能。旨在為石油降解細(xì)菌菌群的獲得方式提供理論依據(jù)，為將細(xì)菌菌群及其相應(yīng)生物菌肥應(yīng)用于實(shí)際的石油污染土壤修復(fù)提供基礎(chǔ)。
　　 本文從天津市大港油田采集石油污染土壤樣品，采用兩種典型的富集馴化培養(yǎng)基，篩選能夠降解石油的細(xì)菌菌群，并

2、對(duì)細(xì)菌菌的數(shù)量及結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析;通過(guò)生長(zhǎng)曲線試驗(yàn)，了解細(xì)菌菌群的生長(zhǎng)特性;選取影響微生物生長(zhǎng)繁殖的環(huán)境因素設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，從而獲得在搖瓶培養(yǎng)條件下，各影響因素對(duì)細(xì)菌菌群降解石油的影響特性;最后通過(guò)室內(nèi)試驗(yàn)，研究了細(xì)菌菌群對(duì)石油污染土壤的修復(fù)效果。研究結(jié)果如下:
　　 1.經(jīng)過(guò)四個(gè)周期的富集馴化，從兩個(gè)石油污染土壤樣品中獲得四種石油降解細(xì)菌菌群。通過(guò)降解性能實(shí)驗(yàn)得出，當(dāng)初始石油濃度為5000mg/L時(shí)，采樣點(diǎn)2經(jīng)過(guò)無(wú)機(jī)鹽加石油培養(yǎng)基富集

3、馴化獲得的細(xì)菌菌群對(duì)石油的降解率最高。
　　 2.通過(guò)對(duì)采樣點(diǎn)2不同富集馴化培養(yǎng)基獲得的菌群進(jìn)行微生物數(shù)量測(cè)定及PCR-DGGE實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，無(wú)機(jī)鹽加石油培養(yǎng)基更有利于微生物數(shù)量的增長(zhǎng)，且微生物多樣性高。
　　 3.對(duì)于同一石油污染土壤，不同富集馴化培養(yǎng)方式獲得的細(xì)菌菌群的優(yōu)勢(shì)菌不同。無(wú)機(jī)鹽加石油馴化得到的細(xì)菌菌群優(yōu)勢(shì)菌為鞘氨醇桿菌屬（Sphingobacterium）和地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformi

4、s)，牛肉膏蛋白胨加石油馴化得到細(xì)菌菌群優(yōu)勢(shì)菌為噬幾丁質(zhì)菌屬（Chitinophaga）。
　　 4.通過(guò)影響因素試驗(yàn)得出，采樣點(diǎn)2無(wú)機(jī)鹽加石油馴化獲得的細(xì)菌茵群在初始石油含量為3000～9000mg/L時(shí)，石油降解率較高(22.21％～28.08％);初始接種量為5％～11％，石油降解率為28.08％～31.36％;該細(xì)菌菌群有較強(qiáng)的耐鹽性，在初始鹽分含量為12g/L時(shí)，石油降解率為25.60％;該細(xì)菌菌群能夠在中性偏堿性的條

5、件下降解石油，有良好的應(yīng)用前景。
　　 5.石油污染土壤修復(fù)實(shí)驗(yàn)表明，通過(guò)兩種富集馴化獲得的細(xì)菌菌群，當(dāng)以菌液的形式投加到土壤中時(shí)，經(jīng)過(guò)58d的修復(fù)，石油降解率達(dá)到40.9％～56.56％，高出CK滅菌組和CK未滅菌組28.69％～50.67％。說(shuō)明外源細(xì)菌菌群的投加對(duì)石油污染土壤的修復(fù)起到了關(guān)鍵作用。
　　 6.土著微生物對(duì)外源微生物的影響與初始微生物的投加量有關(guān)。第二次投加外源細(xì)菌菌群后，并沒(méi)有增大對(duì)石油的降解作用，