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文檔簡(jiǎn)介
1、李(P.salicina Lindl.)為薔薇科(Roseceae)李屬(Prunus L.)植物,落葉小喬木,春季開(kāi)花,一般定植后3-4年開(kāi)始結(jié)果,6-7年進(jìn)入盛果期,是一種優(yōu)良的經(jīng)濟(jì)樹(shù)種。秭秋、秭露、秋露3個(gè)李品種系歷時(shí)十年選育出來(lái)的適合湖北西部700-1500m半高山地區(qū)栽培的優(yōu)良李品種。其中,秭秋是中晚熟品種(8月中旬成熟),秭露、秋露是晚熟品種(約9月中旬成熟)。本文以秭秋、秭露、秋露3個(gè)李品種為試材,應(yīng)用石蠟切片、熒光顯微技
2、術(shù)等方法,對(duì)其3個(gè)品種的開(kāi)花物候期、花粉質(zhì)量、田間雜交授粉坐果率、花粉管萌發(fā)及授粉受精過(guò)程等開(kāi)花生物學(xué)方面的內(nèi)容進(jìn)行系統(tǒng)研究;同時(shí)應(yīng)用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)包括秭秋、秭露、秋露在內(nèi)的湖北三峽庫(kù)區(qū)14個(gè)李品種的親緣關(guān)系進(jìn)行分析。其研究結(jié)果總結(jié)如下:
1、開(kāi)花物候期研究。秭秋、秭露、秋露的花期集中在3月下旬至4月上旬,秭露和秋露(晚熟品種)花期基本相同,秭秋(中熟品種)花期比兩個(gè)晚熟品種晚4-7天,花期為7-10天。單花開(kāi)放過(guò)
3、程包括露瓣期、展瓣期、落瓣期三個(gè)過(guò)程。
2、授粉受精研究。秭秋、秭露、秋露的新鮮花粉活力分別為79.3%、56.8%、70.5%。經(jīng)柱頭觀察,秭歸秋露李系列品種的柱頭有效期為開(kāi)花前2天至開(kāi)花第4天,共6天,最佳授粉期為開(kāi)花前2天至開(kāi)花第2天,共4天。秭秋、秭露、秋露三個(gè)李品種的田間自花授粉座果率分別為8%、5.5%、6.5%,田間異花授粉座果率分別為15.5%、23.5%、18.5%。秭秋花粉在授粉后1h開(kāi)始在柱頭上萌發(fā),
4、36h后花粉管到達(dá)花柱基部,授粉后72h后雙受精過(guò)程完成。
3、ISSR-PCR反應(yīng)體系的建立。通過(guò)正交試驗(yàn),建立了李I(lǐng)SSR-PCR最佳反應(yīng)體系:20ul反應(yīng)體系中,10×Buffer(Mg2+ free)2.0uL、1.5U Tap DNA聚合酶、0.5umol/L的引物、0.2 mmol/L的dNTPs、2.0mmol/L的MgCl2、20ng模板DNA。其反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min、94℃變性45sec、55
5、-56℃退火1min、72℃延伸1.5min、38個(gè)循環(huán),72℃延伸10min,4℃保存。
4、親緣關(guān)系分析。利用優(yōu)化的ISSR-PCR反應(yīng)體系,挑選出10條擴(kuò)增條帶特異、條帶數(shù)適中、清晰、可重復(fù)性好的引物,共擴(kuò)增出101條清晰且可重復(fù)的DNA條帶,其中有83條屬多態(tài)帶,多態(tài)位點(diǎn)比率(Percentage of polymorphic bands,PPB)為82.18%。應(yīng)用POPGENE1.31和NTSYS2.10e軟件
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